Автор: admin

Клименов Л.Н., Строзенко Л.А. 

(Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул)

Острые респираторно-вирусные инфекции являются самыми распространенными заболеваниями в педиатрии. Уровень заболеваемости у детей в 4-5 раз выше, чем у взрослых, при этом половина регистрируемых случаев ОРВИ приходится на долю детей раннего возраста.

В Российской Федерации каждый 4-5-й ребенок может быть отнесен к группе часто болеющих  детей. На эту группу приходится более 60% всех заболеваний детского возраста. Согласно рекомендациям ВОЗ, к часто болеющим относятся дети, у которых частота острых заболеваний составляет 4 раза и более в год. Частые ОРВИ в детском возрасте во многих случаях приводят к нарушению общего развития ребенка, хронизации инфекционного процесса, появлению дистрофических изменений в мышце сердца, почках, надпочечниках. Особенно выраженным бывает снижение работоспособности, отрицательно сказывающееся на школьной успеваемости. Все патологические состояния приводят к изменению процессов энергообмена в клетках крови и внутренних органов.

Цель исследования: оценить эффективность метаболического комплекса «Корилип» у детей часто и длительно болеющих ОРВИ.

Пациенты и методы исследования: под наблюдением находилось 40 детей в возрасте от 2 до 6 лет, посещающие детские дошкольные учреждения, часто болеющие респираторными вирусными инфекциями. Коррекция проводилась ректальными суппозиториями «Корилип»  10 дневными курсами по 1 свече в сутки (с промежутком в 20 дней между курсами) в течение 3 месяцев.

Клинический мониторинг за детьми проводился постоянно с момента применения метаболического комплекса. Параметрами оценки служили частота заболеваемости ОРВИ, продолжительность основных симптомов интоксикации, тяжесть течения заболевания, наличие осложнений, длительность заболевания в целом.

Проводимые клинико-лабораторные исследования включали в себя: общий анализ крови и мочи, ЭКГ, которые проводились до применения суппозиториев и контрольное исследование через 3 месяца после проведенных курсов лечения.

При оценке результатов клинико-лабораторного обследования 40 детей, находившихся под наблюдением, было установлено, что на фоне применения профилактических курсов метаболического комплекса «Корилип» (в период подъема острой респираторной вирусной заболеваемости) –  заболело 29 детей (72,5%), вообще не болело 11 детей (27,5%). Выявлено, что частота эпизодов ОРВИ уменьшилась, по сравнению с предшествующим годом, так за 4 месяца 1 раз перенесли ОРВИ —  4 детей (10%); 2 раза — 19 человек   (47,5%); 3 раза – 4 детей (10%); более 4-х раз – 2 пациента (5%).

Сравнительный анализ клинического течения заболевания показал, что у 27  болеющих детей частота заболеваемости ОРВИ уменьшилась в 2 раза, у 24 пациентов (60%) – заболевание протекало в более легкой форме, по сравнению с предшествующим годом, осложненного течения не было отмечено ни у одного пациента. Отмечено быстрое купирование интоксикационного синдрома (2,5±0,2 против 4,1±0,3 дня (р<0,05)) на фоне применения суппозиториев «Корилип». У 12 детей (30%) выявлено повышение физической активности,  психоэмоционального статуса, улучшение сна обнаружено у 13 пациентов (32,5%), улучшение аппетита установлено у 15 детей (37,5%). Следует отметить хорошую переносимость препарата: в проведенном исследовании не выявлено случаев непереносимости препарата, а также удобный путь введения. Применение суппозиториев «Корилип» способствовало сокращению длительности течения заболевания в целом на 2 суток (до применения составила 8,9±1,5 дня, после проведенных курсов терапии 7,1±0,7 дня, р<0,05).

При лабораторной оценке показателей красной крови, отмечено повышение уровня гемоглобина в среднем с 121,5±2,2 г/л (до применения препарата и после) до 128,7±2,8 г/л, установлено, что  рибофлавин входящий в состав метаболического комплекса играет важную роль в синтезе гемоглобина. При анализе лейкоцитарной формулы достоверных различий и колебаний не отмечалось. При ЭКГ обследовании данной группы детей были выявлены умеренные нарушения процессов реполяризации миокарда (НПР) – у 15 детей (37,5%). После проведения 3  курсов метаболической терапии на контрольном ЭКГ исследовании – у 13 пациентов (32,5%) отмечена нормализация биоэлектрической активности миокарда.

Таким образом, проведенная оценка клинико-лабораторной эффективности суппозиториев «Корилип» свидетельствует о положительном влиянии препарата на частоту и тяжесть течения ОРВИ, отсутствие осложнений у детей, а также на физическую активность, психоэмоциональный статус, сон, аппетит, нормализацию биоэлектрической активности сердечно-сосудистой системы. Профилактическая метаболическая  коррекция в период сезонного подъема острых респираторных вирусных инфекций позволяет снизить частоту, тяжесть и продолжительность заболевания, ускоряет процесс реконвалесценции и соответственно улучшает исходы заболевания.

Тихомирова О.В. Семенова С.Г.

Федеральное агентство по здравоохранению и социальному развитию Федеральное государственное учреждение Научно-исследовательский институт детский инфекция в г. Санкт-Петербург.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

• ЖКТ — желудочно-кишечный тракт
• ИМТ — индекс массы тела
• ОКИ — острые кишечные инфекции
• ДЖВП — дискинезия желчевыводящих путей
• ОРВИ — Острые респираторные вирусные инфекции
• РА — реакция агглютинации
• РИГА — реакция непрямой гемагглютинации
• КЖС — кожно-жировые складки

ВВЕДЕНИЕ

Острые кишечные инфекции (ОКИ) являются одними из самых распространенных заболеваний в педиатрии. Уровень заболеваемости у детей в 2,5-3 раза выше, чем у взрослых, при этом половина регистрируемых случаев острых диарей приходится на долю детей раннего возраста. После перенесенных ОКИ часто формируется хроническая гастроинтестинальная патология, развивается синдром дезадаптации (дисбактериоз, ДЖВП, аллергические реакции, затяжное и рецедивирующее течение ОРВИ.)

В патогенезе кишечных инфекций большое значение имеет повреждение эндотелия сосудов, приводящее к их повышенной проницаемости. Появляются морфологические изменения, в кишечнике часто проявляющиеся как дистрофия энтероцитов с набуханием митохондрий и частичное разрушение эпителия ворсинок. При генерализованных формах ОКИ появляются дистрофические изменения в мышце сердца, почках, надпочечниках. Все патологические состояния приводят к изменению процессов энергообмена в клетках крови и внутренних органов. Кроме того, в настоящее время у большого процента детей имеется исходное нарушение трофического статуса, которое; приводит к снижению адаптационно-компенсаторных возможностей организма, изменению основных функций и, следовательно, к негладкому течению ОКИ у детей. Непосредственно сам период детства характеризуется бурным ростом и развитием, формированием различных органов и систем, усиленным обменом веществ, что требует не только учета специфики заболевания и возникающих при этом обменных нарушений, но также обеспечения возрастных потребностей ребенка в метаболических средствах.

В связи с вышеизложенным, в комплексную терапию детей, больных ОКИ при наличии трофологических нарушений, целесообразно включать препараты с метаболическим действием. Комплексе; «Корилип», включающий в себя гидрохлорид кокарбоксилазы, рибофлавин, липоевую кислоту способен корригировать тканевую гипоксию, влияет на состояние иммунитета, участвует в процессах, компенсирующих гипотрофищю. Так, липоевая кислота в составе полиферментных комплексов участвует в активации цикла Кребса путем регуляции окисления пировиноградной кислоты до ацетил-КоА и затем взаимодействия с оксалацетатом до образования лимонной кислоты и окисления кетоглутаровой кислоты до янтарной кислоты. Кокарбоксилаза активирует тканевой обмен, частвует в коррекции метаболического ацидоза, клеточной гипоксии и других нарушений обмена веществ. Рибофлавин участвует в регулировании окислительно-восстановительных реакций, в процессах углеводного, белкового и жирового обменов. Использование именно этих важнейших кофакторов и субстратов, участвующих в окислительно-восстановительных реакциях и. стимулирующих бразование энергии, позволяет организму получить намного больше энергии, чем, при анаэробном окислении глюкозы.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель исследования: оценить эффективность метаболического комплекса «Корилип» у детей, больных среднетяжелыми и тяжелыми формами острых кишечных инфекций, обусловленных вирусными и бактериальными агентами.

Задачи исследования:

• Определить влияние комплекса «Корилип» при острых кишечных инфекциях у детей различного возраста на трофологический статус и показатели белкового обмена
• Отработать показания к использованию препарату «Корилип» при инфекционных поражениях кишечника.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведено клинико-лабораторное обследование 50 детей, в возрасте от 2 до 9 лет. В группу обследованных вошло 26 мальчиков и 24 девочки, поступивших в клинику в первые 3 дня от начала заболевания и переносивших среднетяжелые и тяжелые формы ОКИ. В группу детей, получавших корилип, вошло 25 человек: 12 девочек и 13 мальчиков. 25 детей, больных ОКИ составили группу сравнения. Группы были репрезентативны по полу, возрасту, этиологии и тяжести течения заболевания, а также получали сходную базисную терапию. Корилип вводился в виде ректальных суппозиторий со 2-3 суток стационарного лечения после снижения частоты стула. Детям до 6 лет препарат назначали по 1 свече в сутки, больным 6 лет и старше по 1 свече 2 раза в сутки ректально, продолжительность курса терапии составляла от 6 до 9 дней (в среднем 7,8±0,3 дня).

Этиологическая диагностика ОКИ осуществлялась с использованием комплекса вирусологических и бактериологических методов. В первые сутки с момента поступления в стационар проводился трехкратный посев фекалий на патогенную и условно-патогенную флору. У части детей проводилась ПЦР диагностика для выявления в фекалиях генетического материала кампилобактерий или сальмонелл. Диагноз ротавирусного гастроэнтерита подтверждали также методом иммуноферментного анализа (ИФА) с выделением ротавирусного антигена в- копрофильтратах, для обнаружения других вирусов (калицивирусы, торавирусы, аденовирусы) использовалась просвечивающая электоронная микроскопия (ПЭМ). Кроме бактериологического и вирусологических методов осуществляли серологическое обследование пациентов в РНГА с антигенами шигелл, сальмонелл и эшерихий.

Клинический мониторинг за детьми проводился ежедневно с момента поступления ребенка в стационар до его выписки. Параметрами клинической оценки заболевания служили проявления ОКИ, такие как наличие болей в животе, метеоризма, спазма кишечника, урчания по его ходу и др., продолжительность рвоты, длительность основных симптомов интоксикации, время нормализации консистенции и частоты стула, длительность пребывания в стационаре. При рассмотрении клинического течения заболевания учитывались также развитие осложнений ОКИ (эксикоз, токсикоз).

Проводимые клинико-лабораторные исследования включали в себя: общий анализ крови и мочи, копрологическое исследование, биохимический анализ крови включающий в себя определение общего белка сыворотки крови, альбумина, трансферрина.

Для каждого пациента проводилась оценка его трофологического статуса Антропометрическая оценка осуществлялась по массе тела, росту, проводилась дентальная оценка, рассчитывался % дефицита массы тела по отношению к нормальным средним величинам (индекс Брока-2), а так же путем расчета массо-ростовых индексов: Коула и индекса массы тела (ИМТ ). Индекс Коула рассчитывался по формуле:

• масса тела в кг: рост в см
• Х100
• 50-й центиль массы тела 50-й центиль роста

Индекс массы тела рассчитывали для каждого пациента по рекомендациям ФАО ВОЗ (1996 г.) по формуле: ИМТ — МТ (кг) / Р2(м), где МТ — масса тела, кг, Р — рост ребенка, м.

Проводилась каллиперметрическая оценка подкожно-жирового слоя путем измерения кожно-жировых складок (КЖС) в трёх стандартных точках при помощи каллипера.

Для более полного и детального изучения трофологического статуса использовали также гематологические методы оценки состояния питания. Среди гематологических показателей оценивали динамику уровня гемоглобина, абсолютное содержание лимфоцитов крови, как косвенный показатель белкового обмена.

Расчет основных показателей трофологического статуса проводился в остром периоде заболевания на 1-2 сутки с момента поступления больного в стационар и в периоде ранней реконвалесценции, на 8-12 сутки.

КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА «КОРИЛИП» У ДЕТЕЙ

При оценке результатов клинико-лабораторного обследования 50 детей, находившихся под наблюдением,—было установлено, что 14% детей переносили ОКИ вирусной этиологии (ротавирусный гастроэнтерит, калицивирусную инфекцию), у 48% получено этиологическое подтверждение бактериальных ОКИ, у 38% этиология ОКИ осталась не установленной. У 76% детей была диагностирована среднетяжелая форма. заболевания, 24% переносили тяжелую форму инфекции. У 80% обследованных пациентов диагностированы осложнения ОКИ, среди которых преобладали экеикоз- 66% и токсикоз с эксикозом — 28%.

Сравнительный анализ клинического течения заболевания показал, что \ больных’ со среднетяжелыми и тяжелыми формами ОКИ, получавшим ректальные свечи корилип, отмечалось более быстрое восстановление аппетита (3,8+0,4 дня против 5,7±0,3 дня в группе сравнения, р<0,05), не было ни одного случая ухудшения диарейного синдрома, быстрее купировался интоксикационный синдром (2,5±0,3 дня против 4,1±0,5 дня, р<0,05), улучшался психоэмоциональный статус, повышалась физическая активность. Следует отметить хорошую переносимость препарата: в проведенном исследовании не выявлено случаев непереносимости препарата, а также удобный путь введения. Применение суппозиториев корилип способствовало сокращению длительности пребывания пациентов в стационаре (7,9±1,4 дня в контрольной группе и 6,4±0,6 дней в группе детей, получавших корилип, р<0,05).

При первичной центильной оценке массы тела детей, больных ОКИ при поступлении в стационар снижение веса менее 25 центиля отмечалось у 38% детей (в группе детей получавших корилип у 36%, в группе сравнения — у 40%). При повторной оценке по окончании курса терапии на 8-10 день в группе детей получавших корилип снижение массы тела менее 25 центиля отмечалось в том же проценте случаев — у 40% детей, в то время как в группе сравнения этот процент вырос практически в 2 раза и составил 76% детей (рис, 1).

Дефицит массы тела по отношению к нормальным средним величинам до начала терапии у детей получавших корилип составлял 5,5±0,3%, в группе сравнения тот же показатель был равен 4,6+0,2%. В периоде ранней реконвалесценции у получавших корилип детей процент дефицита массы тела снизился до 1,8±0,2%, а в группе сравнения — увеличился до 9,1 ±0,3%.

При оценке массо-ростового индекса Коула, низкие величины которого (менее 90) свидетельствуют об острой недостаточности питания, у всех детей в острый период ОКИ был снижен и в динамике заболевания отмечено его нарастание, причем достоверных различий индекса Коула в сравниваемых группах выявлено не было. Значимых колебании ИМТ у детей, переносящих ОКИ не установлено.
При каллиперметрической оценке подкожно-жирового слоя путем измерения кожно-жировых складок (КЖС) в трёх стандартных точках отмечено достоверное увеличение КЖС в области живота у детей получавших корилип по сравнению с контрольной группой в динамике заболевания (рис.2).

При лабораторной оценке трофического статуса достоверных различий в колебания показателей красной крови не отмечалось. Анализ лейкоцитарной формулы показал, что нарастание абсолютной концентрации лимфоцитов отмечено в группе детей, получавших корилип (на 1,07 тысячу клеток в 1 мкл. крови к периоду ранней реконвалесценции), в то время как в группе сравнения имелась тенденция к снижению данного показателя (табл. 1).

*- достоверные отличия по сравнению с группой сравнения при р, по крайней мере, <0,05.

Оценка уровня общего количества белка сыворотки крови, а также уровня альбумина показали, что данные показатели не имели достоверных различий в зависимости от проводимой терапии, что по-видимому связанно с коротким сроком наблюдения за пациентами. Альбумин имеет период полураспада 8-14 суток и его снижение выявляет первичную гипоальмуминемию, а для быстрой оценки адекватности белкового питания определение его сывороточной концентрации недостаточно информативно. Трансферрин, бета-глобулин сыворотки крови, имеющий по сравнению с альбумином значительно более короткий период полураспада (до 8 суток), а также преальбумин позволяют выявить наиболее ранние изменения белкового питания. Проведенные исследования уровня трансферрина показали, что в группе детей получавших корилип отмечалось достоверное увеличение концентрации этого белка, в то время как в группе сравнения уровень трансферрина не менялся (табл.1).

Уровень преальбумина у больных, получавших Корилип, к периоду ранней реконвалесценции достоверно нарастал, в то время как в группе сравнения к периоду выписки из стационара концентрация данного белка не менялась.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, проведенная оценка клинико-лабораторной эффективности суппозиториев корилипа свидетельствует о положительном влиянии препарата на течение среднетяжелых и тяжелых форм ОКИ у детей, а также на нутритивный статус пациентов. Преимущества суппозиториев Корилип служат основанием для их назначения детям со склонностью к гипотрофии, с отягощенным анамнезом по обменным нарушениям, связанным с фоновой патологией у детей. Целенаправленная метаболическая коррекция на ранних этапах течения острой кишечной инфекции у детей позволяет снизить нарушения трофического статуса на фоне ОКИ, способствует более быстрому купированию симптомов заболевания, ускоряет процесс реконвалесценции и соответственно улучшает исходы заболевания.

Авторы: Руководитель отделения для недоношенных детей, Заслуженный деятель науки России Академик РАЕН, доктор медицинских наук. Профессор Яцык Г.В.; Руководитель лаборатории цитохимии, доктор биологических наук Петричук С.В.

В последние годы у большинства новорожденных детей отмечаются стойкие нарушения функций различных органов и систем, развивается синдром дизадаптации (синдром повышенной возбудимости, дизбактериоз, дискенезия желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, затяжное и рецидивирующее течение ОРВИ)

В отделении новорожденных и недоношенных детей проводились исследования по применению ректальных суппозиториев «Корилип», содержащих кофакторы и субстраты различных метаболических циклов.

Применение суппозиториев в детской практике в значительной степени определяется необходимостью ограничения внутривенных и внутримышечных инъекций, особенно у новорожденных и грудных детей.

Суппозиторий «Корилип» содержит:

• кокарбоксилазу,
• рибофлавин (витамин В2),
• липоевую кислоту.

Все продукты питания в организме расщепляются до ацетил-КоА (аминокислоты — до кетоглутарата, сукцината, фумарата и оксалоацетата), который вступает в конечный путь окисления — в цикл трикарбоновых кислот. Оптимизировать деятельность ферментных систем цикла Кребса можно разными путями, в частности, введением субстратов или кофакторов.

Активация цикла ди- и трикарбоновых кислот возможна также \путем регуляции двух важных этапов: 1) окисления пировиноградной кислоты до ацетил-КоА и затем взаимодействия с оксалоацетатом до образования лимонной кислоты; 2) окисления кетоглутаровой кислоты до сукцината (янтарной кислоты). Оба эти этапа катализируются полиферментными комплексами в состав/ которых входитлипоевая кислота.

Кокарбоксилаза является коферментом ферментов, «1участвующих в процессах углеводного обмена, катализирует, карбоксилирование и декарбоксилирование а-кетокислот. Рибофлавинмононуклеотид (ФМН) представляет собой готовую форму кофермента, образующуюся в организме из рибофлавина(В2) путем фосфорилирования. ФМН является предшественником одного из основных переносчиков электронов — флавинадениннуклеотида. ФМН входит в состав активного центра флавиндегидрогеназ, в частности сукцината и а-глицерофосфата.

Комплекс «Корилип» показан в случаях понижения активности флавопротеидов (в более выраженной форме — это проявление хронической тканевой гипоксии), деформации клеточного распределения в сторону преобладания клеток с низкой активностью, низким клеточным разнообразием и пр.

Состав суппозиториев разработан совместными усилиями сотрудниками лаборатории цитохимии под руководством профессора Нарциссова Р.П. и сотрудниками НИИ фармации под руководством канд. фарм. наук Г.С.Киселёвой и Л.В. Сологуб. Состав суппозиториев был определён на основании изменений ферментативной активности в клетках периферической крови и внутренних органов.

Основная задача данного исследования — оценка эффективности применения суппозиториев «Корилип» у доношенных и недоношенных новорожденных была решена с использованием ряда функциональных, биохимических, цитохимических и математико-статистических методов исследования.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

На первой неделе жизни 134 недоношенных новорожденных с гестационным возрастом в среднем 33,4 ± 2,15 недель. Вес недоношенных новорожденных при рождении был 1806 ± 578 грамм, длина 43+ 3 см. У 81 новорожденного наблюдался синдром дыхательных расстройств (СДР), который был обусловлен частичным ателектазом легких, остальные недоношенные новорожденные не имели признаков СДР и составили группу условно здоровых недоношенных новорожденных. Всех новорожденных с СДР, в зависимости от выраженности клинико-лабораторных симптомов дыхательной недостаточности, разделили по степени тяжести (1 — 3) согласно классификации К.А.Сотниковой (1986 г.). Каждому новорожденному, на основе компьютеризированных прогностических алгоритмов, разработанных В.М.Шищенко (1988-1991), составили сценарий психомоторного развития и заболеваемости инфекционной патологией в течение первого месяца жизни. Часть новорожденных (74 ребенка) относились к группе высокого риска развития пневмонии (прогностический коэффициент 10-14 баллов). Все больные с СДГ находились в кювезах с постоянной подачей кислорода через аппарат Боброва. Антибиотики внутримышечно вводились 38 новорожденным, перорально — 9; 12 новорожденных с СДР тяжелой степени и высоким прогностическим коэффициентом развития сепсиса одновременно получали 2 антибиотика. Эуфиллин внутривенно вводился 19 новорожденным, перорально — 17. Кроме этого, больные внутривенно получали пироцетам (6 детей), 10 детей получали 15% раствор глюкозы с витамином С, перорально давались холестерамин, панангин (21 ребенок), кавинтон (18 детей), люминал, тавигил. В комплексное обследование больных с СДР, наряду с общепринятыми анализами крови, рентгенографией грудной клетки, КЩС артериализированной капиллярной крови, включили исследование газообменной функции легких (потребления 02 (пО2), выделения СО2 (вСО2), альвеолярной вентиляции (Уа), минутного объема дыхания (МОД).

В работе было обследовано также 82 ребенка, из которых 56 детей были с гипоксическими поражениями центральной нервной системы и 26 детей были здоровыми. Среди обследованных детей было 32 новорожденных ребенка и 50 детей в возрасте от 1 месяца до года. Среди новорожденных 16 детей были здоровыми, 7 детей перенесли острую интранатальную гипоксию, 9 детей перенесли хроническую антенатальную гипоксию. Среди детей грудного возраста 10 детей были здоровыми, 40 детей с гипоксическим поражением ЦНС.

Назначение и контроль за эффективностью суппозиториев «Корилип» осуществлялся с помощью количественного цитохимического анализа.

Ферментный статус лимфоцитов периферической крови исследовали в классическом варианте постановки реакции (Р.П.Нарциссов, 1969-1984), включающем определение активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и глицерофосфатдегидрогеназы (ГФДГ), а также в различных модификациях классического варианта, позволяющих оценить проницаемость мембран и устойчивость локуса митохондрий, содержащего

сукцинатдегидрогеназу. Проницаемость мембраны митохондрий опосредованно оценивали по активности СДГ после 10 мин. инкубации. Исходили из того, что скорость образования продукта реакции при выявлении активности СДГ максимальна в первые минуты экспозиции и минимальна при времени экспозиции 60 минут.

Анализ результатов цитохимической реакции.

Готовые мазки микроскопируются под водной иммерсией (увеличение 400 раз) на микроскопе Биолам Р-16. Об активности фермента в клетке судят по количеству темно-фиолетовых гранул формазана, образовавшихся в процессе ферментативного восстановления п-нитротетразолия фиолетового.

Для определения активности фермента в популяции лимфоцитов подсчитывается количество гранул в 30 — 100 клетках, а затем рассчитываются по специальной программе параметры распределения популяции (рис. 1)

Рис. 1. Изображения лимфоцитов при проведении цитохимической реакции на выявление активности СДГ (вид под микроскопом, увеличение 1000).

Методы статистической обработки результатов цитохимических реакций.

При статистической обработке полученных данных основную информацию об активности ферментов в клетках крови получают по изменению средней величины (О), которая дает общую характеристику большого количества клеток, но, однако, не отражает различия, существующего между членами клеточной популяции.

где X — число гранул в каждой (-той клетке, N — число клеток.
В норме средняя активность СДГ изменяется в пределах от 18,5 до 19,5 гранул на лимфоцит, средняя активность ГФДГ — от 11 до 13 гранул на лимфоцит.

Клетки крови значительно различаются по активности выявляемого фермента. Коэффициент вариации (V) характеризует рассеивание вариантов относительно среднего значения, отражает гетерогенность клеток по активности фермента или относительную разнородность клеток.

В норме коэффициент вариации для СДГ и а-ГФДГ лимфоцитов меняется от 27,6 до 29,4%.

При существенном различии клеток по активности фермента -показатель высокий (до 50% и выше). Коэффициент вариации увеличивается в условиях гипоксии, в начальный период иммуногенеза, в острый период ОРВИ и острой пневмонии и др.

Коэффициент асимметрии (А) характеризует распределение членов популяции по уровню активности относительно средней величины или уравновешенности клеточного пула с различной ферментативной активностью. При увеличении количества клеток с высокой активностью в сочетании с единичными низкоактивными клетками — коэффициент асимметрии имеет отрицательный знак (А<0). При обратной ситуации — преобладание пула низкоактивных клеток в сочетании с единичными высокоактивными лимфоцитами -коэффициент асимметрии положителен (А>0).

В состоянии физиологического покоя количество клеток с низкой активностью дегидрогеназ уравновешено количеством клеток с высокой активностью: коэффициент асимметрии для обоих ферментов колеблется в пределах от 0 до 0,5. Значения коэффициента асимметрии, отличные от этого диапазона, характерны для патологических состояний. Например, при хронической гипоксии новорожденных в большинстве лимфоцитов наблюдается депрессия дегидрогеназ, что выражается в отрицательном коэффициенте асимметрии.

Коэффициент эксцесса (Е) характеризует избыток или недостаток субпопуляции клеток с нормальной (близкой к средней) активностью фермента.

Функциональное состояние покоя характеризуется эксцессом, приближенным к нулю: коэффициент эксцесса для обоих ферментов меняется от -0.5 до 0.5.

С клинической точки зрения наименее благоприятной ситуацией является состояние клеточной популяции с отрицательным эксцессом (рис.2).

В стадии ремиссии хронического заболевания или при восстановлении после острого заболевания (ОРВИ, пневмония, инфекционные заболевания и пр.) коэффициент эксцесса становится положительным. При выздоровлении популяция лимфоцитов приближается к нормальному распределению (эксцесс около нуля).(рис.2)

Относительная энтропия информации (Н) характеризует разнообразие клеток по их энзиматической активности.

где 

(j) гранул.

Теоретически, если все клетки популяции имеют одинаковую активность, то энтропия информации равна нулю, если все клетки популяции имеют разную активность — энтропия информации равна 1. Иными словами, клеточное разнообразие (Н) характеризует разброс клеточной популяции по активности фермента, независимо от средней активности.

В норме энтропия информации меняется в пределах от 0,73 до 0,80 для СДГ и от 0,60 до 0,70 для ГФДГ. Клинически неблагоприятным признаком является снижение этого показателя, которое может наблюдаться при низкой, нормальной или высокой активности в клетках.
Таким образом, цитохимический метод исследования позволяет определить 5 статистических параметров, характеризующих активность фермента в клеточной популяции.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Поиск тестовых критериев эффективности терапии начали с оценки интенсивности дыхания (до начала базисной терапии) на разных функциональных уровнях организма до и через 40 минут после введения суппозиториев «Корилип» с комплексом кофакторов и субстратов энергетического обмена. Учитывая то обстоятельство, что для показателей дыхания недоношенных новорожденных характерна большая вариабельность, при описании их изменений использовали сигмальные отклонения средних показателей.

Средняя активность СДГ лимфоцитов через 40 минут после введения суппозиториев изменялась в среднем по группе с 20,35 до 21,5 гр/ЛФ, при этом индивидуальные исходные значения активности СДГ колебались от 12, 3 до 31,5 гр/ЛФ. В связи с этим возникло предположение, что внутри группы больных с СДР существуют несколько подгрупп с разной исходной активностью, что влечет за собой разную реакцию на введение суппозиториев. Этим можно объяснить незначительные изменения активности СДГ при усреднении показателя по всей группе детей.

Группа из 62 детей была разделена на две подгруппы. Первую группу составили 45 детей со сниженной активностью СДГ, перенесшие хроническую тканевую гипоксию с синдромом угнетения ЦНС. Во вторую группу вошли 17 детей с синдромом повышенной нервно-рефлекторной возбудимостью, у которых наблюдалась картина гиперактивации СДГ. Анализ индивидуальных изменений показал, что у новорожденных детей с исходно сниженным уровнем активности дегидрогеназ в ответ на введение комплекса «Корилип» происходит увеличение средней активности сукцината и глицерофосфата, при этом изменения структуры популяции клеток (снижение коэффициентов асимметрии, эксцесса, вариации) свидетельствовали об энергетической стабилизации клеточной популяции, особенно после проведенного 10-дневного курса (табл.1, рис.3).

Таблица 1.

Динамика активности сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов у недоношенных новорожденных с СДР после введение комплекса «Корилип».

Рис.3. Динамика средней активности сукцинатдегидрогеназы недоношенных новорожденных с СДР при лечении комплексом «Корилип»
Для исследования степени напряжения энергетического метаболизма в ответ на введение комплекса суппозиториев «Корилип» нами использовалась модификация цитохимического анализа — проба с добавлением к основному субстрату модулятора активности СДГ — изолимонной кислоты (проба с изоцитратом, СДГ(ИЗО)) [Петричук СВ. и соав., 1990]. Известно, что в ответ на действие интенсивного внешнего раздражителя происходит резкое повышение выработки энергетических ресурсов в клетках организма, идущих на обеспечение ответной реакции. Для предотвращения чрезмерного расходования субстратов энергетического цикла и истощения митохондриальной активности существует защитный механизм блокирования основного митохондриального фермента — сукцинатдегидрогеназы. Данный блок инактивируется при проведении реакции по выявлению активности СДГ с добавлением изолимонной кислоты к основному субстрату. Повышение активности фермента в пробе с изолимонной кислотой, по сравнению с пробой на основном субстрате свидетельствует о напряжении энергетического метаболизма у недоношенных детей с СДР до введения суппозиториев.

Для оценки степени напряжения энергетического метаболизма вычисляется коэффициент К:

К=СДГ(ИЗО)/СДГ=1,15 или 115%

Значение коэффициента «К»>1 является неблагоприятным цитохимическим признаком, свидетельствует о напряжении клеточного метаболизма и о нестабильности митохондриальной мембраны. У условно здоровых новорожденных значение коэффициента «К» составляет 80 — 90 %. В процессе лечения суппозиториями «Корилип» значение коэффициента «К» уменьшается и приближается к нормальным значениям (рис.3)

У всех новорожденных детей с СДР наблюдается резкое снижение (на 60%) активности митохондриальной глицерофосфатдегидрогеназы — флавопротеида, отражающего работу глицерофосфатного челночного механизма по транспорту электрон-эквивалентов из цитоплазы в митохондрии и интенсивность обмена фосфолипидов. Через 40 минут после приема комплекса «Корилип» наблюдается тенденция к активации глицерофосфатдегидроназы. В конце 10-дневного курса лечения происходит достоверное увеличение средней активности и сдвиг параметров распределения лимфоцитов в сторону нормализации (таблица 2).

Рис. 4. Динамика коэффициента напряжения энергетического метаболизма («пробы с изоцитратом») у детей первой группы в процессе лечения.

Изменения внутриклеточного метаболизма в ответ на введение комплекса «Корилип» побудили выяснить как оптимизация дыхания на клеточном/субклеточном уровне влияет на интенсивность и эффективность дыхания на более высоких функциональных уровнях организации.

Таблица 2. Динамика активности глицерофосфатдегидрогеназы лимфоцитов у недоношенных новорожденных с СДР после введение комплекса «Корилип» (п=62).

У 51 недоношенного новорожденного с СДР различной степени тяжести исследовали показатели КЩС и напряжения газов артериализированной капиллярной крови до и через 40 минут после введения комплекса препаратов (табл.3). Полученные данные свидетельствовали о том, что кофакторы цикла Кребса в первую очередь активизировали выделение СО2 из организма через легкие и почки. Так, рСО2 с 39,04 снижалось до 34,6 мм рт.ст. (РО.05), а в подгруппе глубоко недоношенных новорожденных это снижение было еще более значительным. После приема комплекса «Корилип» у детей улучшились также показатели содержания кислорода в крови.

Таблица 3. Изменение показателей кислотно-щелочного состояния артериализированной капиллярной крови у недоношенных новорожденных с СДР через 40 минут после введения комплекса «Корилипа» (М ±т)

В подгруппе глубоко недоношенных новорожденных через 40 минут после введения комплекса «Корилипа» обнаружено смещение рН в щелочную сторону с 7,341 до 7,393 (РО.05), а также уменьшение дефицита оснований (ВЕ) с -4,46 до -2,57 (Р<0.05). В большей степени сдвиг КЩС в сторону физиологической нормы, по-видимому, был обусловлен нормализацией внутриклеточного метаболизма. Нельзя исключить и прямого ощелачивающего воздействия «Корилипа». Так, А.Г.Антонов (1980) описал выраженный внутриэритроцитарный ощелачивающий эффект кокарбоксилазы у недоношенных новорожденных с перинатальной энцефалопатией.

Воздействие одноразовой дозы «Корилипа» на органный уровень дыхания оценили по динамике газообменной функции легких (табл.4).

Таблица 4. Изменение газообменной функции у недоношенных новорожденных с СДР через 40 минут после введения комплекса «Корилип».

Через 40 минут после введения комплекса препаратов отмечено увеличение альвеолярной вентиляции (Уа). Наиболее выраженным это увеличение было в подгруппе глубоко недоношенных новорожденных: с 119.9 до 152.55 мл/мин (на 27.2%, Р<0.05).

Выделение СО2 (вСО2) легкими увеличивалось более значительно, чем поглощение 02 (пО2), на что указывало и повышение дыхательного коэффициента (ДК). В подгруппе глубоко недоношенных новорожденных вСО2 увеличивалось с 6,38 до 7,61 (на 19.3%, Р<0.05). При этом механическая функция легких, которую лучше всего отражает минутный объем дыхания (МОД), не изменялась. Это указывало на то, что повышение альвеолярной вентиляции (\/а) происходило не за счет увеличения объема легочной вентиляции, а за счет повышения эффективности внешнего дыхания, что подтверждало и значительное снижение ОЕ в подгруппе глубоко недоношенных новорожденных.

Индивидуальная чувствительность больного организма к «Корилипу» побудила оценить диагностическую ценность индукции дыхания в рамках околочасового биоритма.

Для этого провели пошаговый регрессионный анализ изучаемых показателей дыхания. В качестве независимой переменной использовали степень синдрома дыхательных расстройств (таблица 5).

Из приведенной таблицы 5 следует, что самую высокую информативность при определении степени тяжести СДР имели 40-минутный прирост средней активности СДГ и ГФДГ в популяции лимфоцитов и параметры, характеризующие проницаемость митохондриальной мембраны (параметры СДГ (10 мин.)). Таким образом, проведенный анализ выявил большую информативность показателей внутриклеточного метаболизма по сравнению с параметрами КЩС и показателями газообменной функции легких.

Таблица 5. Определение степени тяжести СДР (1-3) у недоношенных новорожденных по изменению ферментного статуса лимфоцитов на введение комплекса «Корилип».

Множественный коэффициент корреляции Р=0.95 п=62 Зависимая переменная — степень тяжести СДР.

где сЮДГО, аТФДГС! — изменение активности СДГ и ГФДГ через 40 минут после введения суппозитория «Корилип»

Анализ показал прогностические возможности околочасового теста дыхания для оценки продолжительности кислородотерапии при лечении недоношенных детей с СДР. По реакции ферментного статуса лимфоцитов на однократное введение комплекса «Корилип» можно с точностью более чем на 90% прогнозировать продолжительность кислородотерапии (прогностическое регрессионное уравнение представлено в таблице 6).

Таблица 6. Определение продолжительности кислородотерапии у недоношенных новорожденных с СДР по реакции ферментного статуса лимфоцитов на введение комплекса «Корилип» и ряду клинических признаков. 
Множественный коэффициент корреляции Р=0.97 п=62
Зависимая переменная — продолжительность кислородотерапии (в днях) .

Таким образом, через 40 мин после введения комплекса «Корилип» у недоношенных новорожденных с СДР происходит улучшение интенсивности дыхания на различных функциональных уровнях организма, что указывает на возможность существенного повышения эффективности дыхания, не меняя режим легочной вентиляции. У большинства из них кофакторы цикла Кребса вызывали увеличение интенсивности дыхания как на клеточно-субклеточном, так и на органном уровнях. В ряде случаев происходило снижение показателей дыхания, чаще всего это снижение было направлено в сторону физиологической нормы.

Кофакторы цикла Кребса, действуя главным образом через конечное звено утилизации кислорода, повышают интенсивность дыхания в среднем на 25%. Десятидневный курс лечения комплексом «Корилип» оказался эффективным для недоношенных новорожденных с СДГ, однако у наиболее тяжелых детей для необходимо увеличить продолжительность до 15-20 дней, а для закрепления терапевтического эффекта увеличить кратность курсов до 3-6.

Значительное повышение интенсивности внешнего дыхания у больных с СДР, по-видимому, обусловлено частичным купированием «стресса» на уровне митохондрий. Одновременно происходит усиление аэробного гликолиза в клетках миокарда (увеличение объемной скорости кровотока), дыхательной мускулатуры и улучшение кислородотранспортной функции крови: снижение ацидоза, уменьшение вязкости эритроцитарной мембраны.

Избирательное действие «Корилипа» на систему дыхания и высокая информативность клеточного и субклеточного ее звена позволяет использовать потенцированный околочасовой биоритм в качестве диагностико-прогностического теста для индивидуализации лечения недоношенных новорожденных с бронхолегочной патологией. С целью выявления эффективности применения препаратов комплекса «Корилип» было обследовано также 32 новорожденных ребенка и 50 детей в возрасте от 1 месяца до года. Среди новорожденных 16 детей были здоровыми, 7 детей перенесли острую интранатальную гипоксию, 9 детей перенесли хроническую антенатальную гипоксию. Среди детей грудного возраста 10 детей были здоровыми, 40 детей с гипоксическим поражением ЦНС. Обследованные дети с гипоксическим поражением ЦНС получали комплексное лечение, включающее метаболитную терапию комплексом «Корилип». У новорожденных детей, перенесших хроническую внуьриутробную гипоксию на фоне комплексного лечения отмечалась положительная динамика в течении гипертензионного синдрома (клинические симптомы внутричерепной гипертензии за время наблюдения не нарастали, а у некоторых детей отмечалась тенденция к купированию этих симптомов), синдрома угнетения ЦНС (дети становились более активными, восстанавливался режим сна и бодрствования, отмечалась положительная динамика весовой кривой. У новорожденных, перенесших острую интранатальную гипоксию с клиникой синдрома повышенной нервно-рефлекторной возбудимости и ультразуковыми признаками формирующейся внутричерепной гипертензии в виде повышения эхоплотности отдельных структур мозга, метаболитная терапия тормозила нарастание неврологической симптоматики, а в ряде случаев способствовала купированию данных симптомов. На наш взгляд подобное воздействие метаболитной терапии препаратом «Корилип» у данного контингента новорожденных детей связано со своевременной патогенетически обоснованной коррекции энергетического метаболизма не только нервной клетки, пострадавшей в результате острого или хронического кислородного голодания, но и клеток эндотелия сосудистых сплетений мозга, что в конечном итоге приводит к восстановлению обменных процессов, связанных с продукцией внутримозговой жидкости.

Нами выявлено, что у новорожденных, перенесших острую интранальную гипоксию, наблюдается высокая активность митохондрий (по активности СДГ), а у новорожденных, перенесших хроническую внутриутробную гипоксию, показатели митохондриальной активности снижены. В процессе комплексного лечения с использованием ректальных суппозиториев «Корилип» у детей, перенесших острую интранатальную гипоксию и хроническую внутриутробную гипоксию, показатели митохондриальной активности достоверно приблизились к уровню условно здоровых детей (рис. 5).

Рис. 5. Динамика цитохимических показателей у детей в процессе комплексного лечения с использованием комплекса «Корилип».

Таким образом, проведенные нами исследования показали эффективность применения препарата «Корилип» у новорожденных доношенных и недоношенных детей. Применение препарата «Корилип» показано как самостоятельное лечение, так и в комплексе с базисной терапией. У здорового ребенка метабол итная терапия должна применяться в «критические периоды» развития: в периоды становления новых функций (ребенок начинает держать головку, начинает сидеть, стоять, ходить и т.д.), перед поступлением в детское учреждение, в периоды инфекционных эпидемий, перед проведением профилактических прививок, во время заболевания и в любой другой стрессовой ситуации.

Литература :

1. Арипова А.А. Патогенетические основы метаболитной терапии перинатальной энцефалопатии у недоношенных детей : Дисс. Докт. мед. наук.- М., 1983.-303с.
2. Валюлис А., Кучинскас А. Уровень клеточного метаболизма и возможности его регуляции у недоношенных новорожденных с синдромом дыхательных расстройств// Тез. Второго Всесоюзного конгресса по болезням органов дыхания. -Челябинск, 1991.-с.246.
3. Валюлис А., Петричук СВ., Шищенко В.М., Нарциссов Р.П. Оценка состояния недоношенного ребенка с синдромом дыхательных расстройств по интенсивности дыхания на разных иерархических уровнях организма// Деп. ВНИИМИ, № 21530.-М., 1991.-26с.
4. Измайлова Т.Г., Петричук СВ., Агейкин В.А., Кузнецова Е.Ю. «Оптимизация процессов адаптации у детей 1-5 месяцев жизни с гипоксически — ишемическим поражением ЦНС» РГМУ, НЦЗД, Москва, Россия. Материалы IX съезда педиатров России: «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.242.
5. Кондрашова М.Н. Метаболические состояния митохондрий при разных физиологических состояниях организма // Молекулярные механизмы и регуляция экспериментального обмена. — Пущино, 1987.-с. 140-153.
6. Кондрашова М.Н., Григоренко Е.В., Бабский А.М. Гомеостазирование физиологических функций на уровне митохондрий // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза,-Новосибирск: Наука, 1987.-е. 40-66.
7. Коноплева Т.Н., Лозовская Л.С, Сидельникова В.М., Шищенко В.М., Морозова Н.А., Бомбардирова Е.П., Зубкова И.В., Королькова
8. Е.Л., Петричук СВ., Духова З.Н. « Профилактика внутриутробных вирусных инфекций и связанной с ними патологии плода и ребенка » НЦЗД РАМН, НЦ АГиП РАМН, Москва, Россия. Материалы IX съезда педиатров России: «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.290.
9. Лукьянова Л.Д. Особенности работы дыхательной цепи в условиях кислородной недостаточности // Молекулярные механизмыи регуляция энергетического обмена. — Пущино, 1987,- с. 153-161.
10. Нарциссов Р.П. Анализ изображения клетки — следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии. // Педиатрия, 1998.-
11. №4.-С. 101-105.
12. Нарциссов Р.П. и др. Здоровье, болезнь и лекарство (цитохимическая экспертиза с помощью анализатора изображений). -М, 1999.-25 с.
13. Нарциссов Р.П. Применение п-нитротетразолия фиолетового для количественного цитохимического определения дегидрогеназ лимфоцитов человека. // Арх. анат., 1969. — № 5. — С. 85 — 91.
14. Петричук СВ., Шищенко В.М., Нарциссов Р.П., Духова З.Н. Модификации цитохимического анализа как тест-система для оценки состояния ребенка и эффективности применяемой терапии // Деп.ВНИИМИ. — М., 1990-18с.
15. Петричук СВ., Шищенко В.М., Духова З.Н. Цитоморфометрическая характеристика лимфоцитов у здоровых и больных детей Т Москва, Россия. Материалы IX съезда педиатров России ; «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.449.\
16. Степанов А.А., Нарциссов Р.П., Яцык Г.В., Семенова Г.Ф., Дворяковский И.В., Иванов А.П. Центральный и церебральный кровоток у новорожденных детей с перинатальной энцефалопатией в зависимости от состояния митохондрий лимфоцитов крови. // В сб.: «Митохондрии в патологии». Пущино, 2001. — С.22-25
17. .Болтнева СМ., Хан М.А., Петричук СВ., Шищенко В.М. Функциоанльная активность митохондрий в лимфоцитах детей с
18. принатальными поражениями ЦНС. // В сб.: «Митохондрии в патологии». Пущино, 2001. — С.30-32
19. 16. Измайлова Т.Г., Петричук СВ., Агейкин В.А., Кузнецова Е.Ю. Оптимизация процессов адаптации у детей 1-| месяцев жизни с гипоксически — ишемическим поражением ЦНС\\ Материалы IX съезда педиатров России «Детское здравоохранение, России: Стратегия развития».М., 2001.-С.242.
20. 17. Усманов У.Х., Киселева ПС, Цейтина А.Я., Шищенко В.М., Валюлис А. Создание и исследование детских суппозиториев с
21. витаминами группы В //Фармацея.- М., 1991.- №1.-с.20-24.
22. Шищенко В.М., Валюлис А. Влияние кофакторв цикла Кребса на систему мать-плод-ребенок//Тез. Республиканской конференции « Инфекция в перинатологии».- Вильнюс,1990.-с.97-100.
23. Яцык Г.В., Жукова Г.П., Бомбардирова Е.П. Гипоксия плода и новорожденного // Сов. Педиатрия. — М.: Медицина, 1983.-с.42-56.

Проводились исследования по применению ректальных суппозиториев Корилип в отделении новорожденных и недоношенных детей Научного центра здоровья детей РАМН.

Основная задача данного исследования — оценка эффективности применения суппозиториев Корилип у доношенных и недоношенных новорожденных была решена с использованием ряда функциональных, биохимических, цитохимических, и математико-статистических методов исследования.

Оценку эффективности проводили на 134 недоношенных новорожденных первой недели жизни. У 81 новорожденного наблюдался синдром дыхательных расстройств (СДР), остальные недоношенные новорожденные не имели признаков СДР и составили группу условно здоровых недоношенных новорожденных.

В работе было обследовано также 82 ребенка, из которых 56 детей были с гипоксическими поражениями центральной нервной системы и 26 детей были здоровыми. Среди обследованных детей было 32 новорожденных ребенка и 50 детей в возрасте от 1 месяца до года. Среди новорожденных 16 детей были здоровыми, 7 детей перенесли острую интранатальную гипоксию, 9 детей перенесли хроническую антенатальную гипоксию. Среди детей грудного возраста 10 детей были здоровыми, 40 детей с гипоксическим поражением ЦНС.

В комплексное обследование больных с СДР, наряду с общепринятыми анализами крови, рентгенографией грудной клетки, КЩС артериализированной капиллярной крови, включили исследование газообменной функции легких (потребления 02 (пО2), выделение СО2 (вСО2), альвеолярной вентиляции (Уа), минутного объема дыхания (МОД). Назначение и контроль эффективности суппозиториев осуществлялся с помощью количественного цитохимического анализа.

Ферментный статус лимфоцитов периферической крови исследовали в классическом варианте постановки реакции, включающем определение активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и глицерофосфатдегидрогеазы (ГФДГ), а также в различных модификациях классического варианта, позволяющих оценить проницаемость мембран и устойчивость локуса митохондрий, содержащего сукцинатдегидрогиназу. Проницаемость мембраны митохондрий оценивали по активности СДГ после 10 мин. инкубации. Исходили из того, что скорость образования продукта реакции при выявлении активности СДГ максимальна в первые минуты экспозиции и минимальна при времени экспозиции 60 мин.

Результаты.

Анализ индивидуальных изменений показал, что у новорожденных детей с исходно сниженным уровнем активности дегидрогеназ в ответ на введение комплекса Корилип происходит увеличение средней активности сукцината и глицирофосфата, при этом изменения структуры популяции клеток свидетельствовали об энергетической стабилизации клеточной популяции, особенно после проведенного 10-дневного курса. Для оценки степени напряжения энергетического метаболизма вычисляют коэффициент К. Значение «К»>1 является неблагоприятным признаком, свидетельствует о напряжении клеточного метаболизма и о нестабильности митохондриальной мембраны. У условно здоровых новорожденных значение «К» составляет 80-90%. В процессе лечения суппозиториями Корилип значение «К» уменьшается и приближается к норме. У всех новорожденных детей с СДР наблюдается резкое снижение (на 60%) активности митохондриальной глицерофосфатдегидрогеназы — флавопротеида, отражающего работу глицерофосфатного челночного механизма по транспорту электрон-эквивалентов из цитоплазмы в митохондрии и интенсивность обмена фосфолипидов. Через 40 мин после приема комплекса Корилип наблюдается тенденция к активации глицерофосфат дегидрогеназы. В конце 10-дневного курса лечения происходит достоверное увеличение средней активности и сдвиг параметров распределения лимфоцитов в сторону нормализации.

У 51 недоношенного новорожденного с СДР различной степени тяжести исследовали показатели КЩС и напряжение газов артериализированной капиллярной крови до и через 40 мин после введении комплекса препаратов. Полученные данные свидетельствовали о том, что кофакторы цикла Кребса в первую очередь активизировали выделение СО2 из организма через легкие и почки. После приема комплекса Корилип у детей улучшились также показатели содержания кислорода в крови.

В подгруппе глубоко недоношенных новорожденных через 40 мин после введения комплекса Корилип обнаружено смещение рН в щелочную сторону с 7,341 до 7,393, а также уменьшение дифицита оснований (ВЕ) с -4,46 до -257. В большей степени сдвиг КЩС в сторону физиологической нормы, по-видимому, был обусловлен нормализацией внутриклеточного метаболизма. Нельзя исключить прямого ощелачивающего воздействия Корилипа.

Воздействие одноразовой дозы Корилипа на органный уровень дыхания оценили по динамике газообменной функции легких.

Через 40 мин после введения комплекса отмечено увеличение альвеолярной вентиляции (Уа). Наиболее выраженным это увеличение было в подгруппе глубоко недоношенных новорожденных (на 27,2%).

Выделение СО2 легкими увеличилось более значительно, чем поглощение 02, на что указывало и повышение дыхательного коэффициента (ДК). В подгруппе глубоко недоношенных новорожденных вСО2 увеличилось на 193%. При этом механическая функция легких, которую лучше всего отражает МОД, не изменялась. Это указывает на то, что повышение альвеолярной вентиляции (Уа) происходило не за счет увеличения объема легочной вентиляции, а за счет повышения эффективности внешнего дыхания, что подтверждало и значительное снижение DЕ в подгруппе глубоко недоношенных новорожденных.

Таким образом, через 40 мин после введения комплекса Корилип у недоношенных новорожденных с СДР происходит улучшение интенсивности дыхания на различных функциональных уровнях организма, что указывает на возможность существенного повышения эффективности дыхания, не меняя режим легочной вентиляции. У большинства из них кофакторы цикла Кребса вызывали увеличение интенсивности дыхания как на клеточно-субклеточном, так и на органном уровнях. В ряде случаев происходило снижение показателей дыхания, чаще всего это снижение было направлено в сторону физиологической нормы.

Кофакторы цикла Кребса, действуя главным образом через конечное звено утилизации кислорода, повышают интенсивность дыхания в среднем на 25%. Десятидневный курс лечения комплексом Корилип оказался эффективным для недоношенных новорожденных с СДР, однако у наиболее тяжелых детей необходимо увеличить продолжительность до 15-20 дней, а для закрепления терапевтического эффекта увеличить кратность курсов до 3-6.

Наряду с повышением интенсивности внешнего дыхания, одновременно происходит усиление аэробного гликолиза в клетках миокарда (увеличение объемной скорости кровотока), дыхательной мускулатуры и улучшение кислородтранспортной функции крови: снижение ацидоза уменьшение вязкости эритроцитарной мембраны. Избирательное действие Корилипа на систему дыхания и высокая информативность клеточного и субклеточного ее звена.

С целью выявления эффективности применения препарата Корилип было обследовано также 32 новорожденных ребенка и 50 детей в возрасте от 1 месяца до года. Среди новорожденных 16 детей были здоровыми, 7 детей перенесли острую интранатальную

гипоксию, 9 детей перенесли хроническую антенатальную гипоксию. Среди детей грудного возраста 10 детей были здоровыми, 40 детей с гипоксическим поражением ЦНС. У новорожденных детей, перенесших хроническую внутриутробную гипоксию на фоне комплексного лечения, отмечалась положительная динамика в течение гипертензивного синдрома, дети становились более активными, восстанавливался режим сна и бодрствования, отмечалась положительная динамика весовой кривой.

В процессе комплексного лечения с использованием ректальных суппозиториев у детей, перенесших острую интронатальную гипоксию и хроническую внутриутробную гипоксию, показатели митохондриальной активности достоверно приблизились к уровню здоровых детей.

Таким образом, проведенные исследования показали эффективность применения препарата Корилип у новорожденных доношенных и недоношенных детей. Применение препарата показано как самостоятельное лечение, так и в комплексе с базисной терапией. У здорового ребенка метаболитная терапия должна в «критические» периоды развития: в периоды становления новых функций (начинает держать головку, сидеть, стоять, ходить и т.д.), перед поступлением в детское учреждение, в периоды инфекционных эпидемий, перед проведением профилактических прививок, во время заболевания и в любой другой стрессовой ситуации.

Суппозитории Корилип апробировались в отделении лечебной физкультуры и спортивной медицины, в клинико-диагностическом центре НЦЗД РАМН.

Применение суппозиториев в детской практике в значительной степени определяется необходимостью ограничения внутривенных и внутримышечных инъекций, особенно у новорожденных и грудных детей. Основная задача данного исследования — оценка эффективности применения суппозиториев Корилип у пациентов разного возраста была решена с использованием ряда функциональных, биохимических, цитохимических и математико-статистических методов исследования. В отделении лечебной физкультуры и врачебного контроля было обследовано 112 детей в возрасте от 9 до 14 лет, занимающихся спортом. Перед назначением комплекса Корилип и после курса терапии проводилось комплексное исследование состояния сердечно-сосудистой системы юных спортсменов. Психологическое анкетирование проводилось по двум тестам — определение уровня тревожности; и самочувствие активность, настроение. Коррекция ректальными суппозиториями проводилась также у 125 детей раннего возраста, посещающих детские дошкольные учреждения, из которых 85 детей были практически здоровыми, 40 детей — частоболеющими.

Назначение и контроль над эффективностью суппозиториев осуществлялся с помощью количественного цитохимического анализа. Для оценки функциональной активности митохондрий использовали цитоморфоденситометрический метод определения активности СДГ на анализаторе изображения. Анализатор изображения помимо подсчета числа гранул формазана — продукта цитохимической реакции — в каждой клетке позволяет определить их геометрические и оптические параметры. Метод позволяет оценить функциональную активность отдельно лежащих митохондрий и митохондрий, объединенных в конгломераты (кластеры).

Результаты.

Для улучшения процессов адаптации к мышечным нагрузкам, 65 детям была проведена коррекция энергетического состояния тремя 10-дневными курсами комплекса Корилип. В результате проведенного лечения комплексом достигнут положительный эффект — нормализация биоэлектрической активности миокарда в 94% у детей 9-11 лет и 92%- 12-14 лет при умеренных нарушениях процессов реполяризации (НПР) миокарда и в 82% у детей 9-11 лет и 78% -12-14 лет — при выраженных НПР. По данным психологического тестирования в 78% случаев у детей выявлялся средний уровень тревоги, характеризующийся немотивированным беспокойством. Высокий уровень тревожности, установленный в 17% случаев, характеризовался сильным беспокойством, нервозностью, и беспокойной активностью, иногда без внешней причины. И только 5% детей оказались достаточно уравновешенными. У 58 детей в возрасте 9-14 лет проведена оценка эффективности комплекса Корилип на уровне митохондрий лимфоцитов. У условно здоровых детей, не подвергавшихся интенсивным нагрузкам, наблюдается высокая функциональная активность митохондрий лимфоцитов при выявлении активности СДГ. Наиболее активно работающие митохондрии объединяются в кластеры от 8-10 митохондрий с увеличенной оптической плотностью. При коррекции препаратом наблюдается изменение функциональной активности митохондрий в сторону нормализации: уменьшается количество возбужденных митохондрий, увеличивается количество типичных митохондрий с умеренной активностью, характерных для функционально уравновешенного состояния.

Таким образом, на фоне комбинации энергооптимизирующих препаратов комплекса Корилип у детей, интенсивно занимающихся спортом, происходит нормализация субклеточного и клеточного уровня, нормализация функциональных изменений ССС, а так же повышается физическая работоспособность; нормализуется биоэлектрическая активность миокарда, отмечается снижение обострений очагов хронической инфекции, уменьшаются астено-невротические проявления, происходит нормализация психоэмоционального статуса. Эффективность применения, отсутствие побочных эффектов, простота использования позволяет рекомендовать препарат Корилип детям в возрасте 9-14 лет, интенсивно занимающихся спортом, с целью профилактики функциональных изменений ССС, что наряду с подбором адекватной физической нагрузки позволяет регулировать тренировочный процесс юных спортсменов. Дошкольникам в возрасте 3-6 лет суппозитории назначались 10- дневными курсами в течение 3 месяцев. Применение этого комплекса значительно облегчило адаптацию детей к детскому учреждению, у частоболеющих детей в 2 раза снизило частоту заболевания ОРЗ.

Таким образом, проведенные исследования показали эффективность применения препарата Корилип у детей раннего и школьного возраста.

В НИИ педиатрии РАМН были проведены клинические испытания ректальныхсуппозиториев Корилип.

Суппозитории апробировались в клинико-диагностическом центре и лаборатории цитохимии НИИ педиатрии НЦЗД РАМН. Исследования проводились совместно с Центром акушерства и гинекологии и перинатологии РАМН, с Московским противогерпетическим центром, с 25-м роддомом. Основная задача —оценка эффективности применения суппозиториев Корилип у пациентов разного возраста. Испытание эффективности проводилось у 64 женщин группы риска и у детей, наблюдавшихся на протяжении года после рождения. Суппозитории применялись на фоне базисной терапии и у 31 женщины во время беременности под обязательным контролем цитохимического анализа. Только базисную терапию получали 33 женщины группы сравнения.

Результаты.

Корилип необходимо назначать всем женщинам группы высокого риска развития перинатальной патологии у детей. В группу риска входят женщины с отягощенным акушерским анамнезом в виде повторных выкидышей, мертворождений, бесплодия и хронических воспалительных заболеваний придатков; женщины с хроническими соматическими заболеваниями , часто болеющие ОРВИ, имеющие высокую эмоциональную и физическую нагрузку. Перечисленная патология определяет и исходные цитохимические показатели (до приема препарата). Снижено количество лимфоцитов с типичной активностью, преобладает клетки с низкой активностью. Женщинам группы риска показано назначение препарата, как в качестве самостоятельного лечения, так и в комплексе со специализированной терапией.

Выбор продолжительности курсов (10 дней) объясняется тем, что через 4-5 дней после начала приема наблюдается положительная динамика в цитохимическом статусе лейкоцитов. Количество назначаемых курсов определяется положительной динамикой цитохимических показателей и стабильностью их изменений. Как правило, необходимо не менее 6-8 курсов для нормализации показателей ферментного статуса и самочувствия женщины.

Эффективность метаболической коррекции можно оценить с двух сторон. Во-первых, сравнением течения и исхода беременности в двух группах женщин — получавших и не получавших препарат. Во-вторых, оценкой исхода беременности и развитием детей на первом году жизни в зависимости от сроков, в которые была начата метаболическая коррекция женщинам группы риска.

Выявлено, что у беременных женщин группы риска, получавших курсовое лечение комплексом Корилип на фоне базисной терапии, частота осложнений беременности повторными ОРВИ во 2 и 3 триместрах была в 2,5 раза ниже по сравнению с не получавшими. У них реже отмечались обострения хронических очагов инфекций. Гипохромная анемия у беременных, получавших метаболическую коррекцию, диагностирована в 2,9 раза ниже, чем в группе сравнения. Клинические признаки морфо-функциональной незрелости среди доношенных детей наблюдались у 23,1% детей, получавших Корилип, и 42,5% детей — не получавших его. В свою очередь среди женщин, которым проведено не менее 6-8 курсов, клинические признаки морфофункциональной незрелости отмечались почти в 2 раза реже по сравнению с получившими ее 1 -3 раза. У женщин, получавших его за 3-9 месяцев до беременности, наблюдалась стабилизация месячного цикла с наличием четко выраженной двухфазности, меньшей болезненности менструации. Все женщины родили живых доношенных детей (на 39-40 ой неделе) с весом 2800-3900; оценкой 8-9 баллов, неонатальный период у них протекал без осложнений. На первом году дети практически не болели. К 1 году нервно-психическое развитие у них было нормальным и соответствовало 28-30 баллам. Основные рекомендации по применению Корилип у женщин состоят в следующем:

• Наиболее эффективное по отношению к ребенку применение препаратов-
  метаболитов наблюдается у женщин, получающих терапию за 6-9 месяцев до и в
  течение беременности под контролем цитохимического анализа. Ранее применение
  препарата обеспечивает более высокий уровень энергетики тканей и клеток
  беременной женщины (плаценты, тканей плода), новорожденных и грудных детей,
  сведение к минимуму перинатальных осложнений, лучшему развитию детей на
  первом году жизни.
• Продолжительность курса терапии (10 дней) и их кратность определяется
  показателями активности ферментов лейкоцитов периферической крови.
• В течение беременности необходимо назначение препарата в критические периоды
  (по цитохимическим показателям): 5-8 недель, 10-12 недель, 20 неделя, 27-28недель, 30-32 неделя, 35-37 недель.

Подготовка супружеской пары к беременности должна начинаться не менее чем за6-9 месяцев до беременности, в оптимальном варианте год жизни родителей дозачатья должен быть отнесен к онтогенезу ребенка.

Исследовалась эффективность использования препарата при острых кишечных инфекциях у детей в ФГУ НИИ детских инфекций г. Санкт-Петербурга.

Проведено клинико-лабораторное обследование 50 детей, в возрасте от 2 до 9 лет. В группу обследованных вошло 26 мальчиков и 24 девочки, поступивших в клинику впервые 3 дня от начала заболевания со среднетяжелыми и тяжелыми формами ОКИ. Корилип вводился ректально с 2-3 суток стационарного лечения после снижения частоты стула. Детям до 6 лет препарат назначали по 1 свече в сутки, больным 6 лет и старше по 1 свече 2 раза в сутки, продолжительность курса терапии составляла от 6 до 9 дней. Этиологическая диагностика ОКИ осуществлялась с использованием комплекса вирусологических и бактериологических методов: ПЦР диагностики, иммуноферментный анализ (ИФА), просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ); серологического обследования.

Параметрами клинической оценки служили проявление ОКИ, такие как наличие болей в животе, метеоризма, спазма кишечника, урчание по его ходу, продолжительность рвоты, длительность основных симптомов интоксикации, время нормализации консистенции и частоты стула, длительность пребывания в стационаре.

Проводимые клинико-лабораторные исследования включали в себя: общий анализ крови и мочи, капрологическое исследование, биохимический анализ крови, включающий в себя определение общего белка сыворотки крови, альбумина, трансферрина. Антропометрическая оценка осуществлялась по массе тела, росту, проводилась центильная оценка, рассчитывался индекс Брока-2.

Среди гематологических показателей оценивали динамику уровня гемоглобина, абсолютное содержание лимфоцитов крови, как косвенный показатель белкового обмена.

Результаты.

Сравнительный анализ клинического течения заболевания показал, что у больных со среднетяжелыми и тяжелыми формами ОКИ, получавшими свечи Корилип, отмечалось более быстрое восстановление аппетита, не было ни одного случая ухудшения диарейного синдрома, быстрее купировался интоксикационный синдром, улучшался психоэмоциональный статус, повышалась физическая активность.

Не было случаев непереносимости препарата. Применение препарата способствовало сокращению длительности пребывания пациентов в стационаре, При оценке подкожно-жировых складок в трех стандартных точках отмечено достоверное увеличение КЖС в области живота у детей получавших Корилип по сравнению с контрольной группой в динамике заболевания.

При лабораторной оценке трофического статуса достоверных различий в колебании показателей красной крови не отмечалось. Анализ лейкоцитарной формулы показал, что нарастание абсолютной концентрации лимфоцитов отмечено в группе детей, получавших Корилип, в то время как в группе сравнения имелась тенденция к снижению данного показателя.

Проведенные исследования уровня трансферрина показали, что в группе детей получавших Коррилип отмечалось достоверное увеличение концентрации этого белка, в то время как в группе сравнения уровень трансферина не менялся.

Уровень преальбумина у больных, получавших корилип, к периоду ранней реконвалесценции достоверно нарастал, в то время как в группе сравнения к периоду выписки больных из стационара концентрация данного белка не менялась.

Заключение.

Проведенная оценка клинико-лабораторной эффективности суппозиториев Корилип свидетельствует о положительном влиянии препарата на течение среднетяжелых и тяжелых форм ОКИ у детей, а так же на нутритивный статус пациентов. Преимущества суппозиториев Корилип служат основанием для их назначения детям со склонностью к гипотрофии, с отягощенным анамнезом по обменным нарушениям, связанным с фоновой патологией у детей. Целенаправленная метаболическая коррекция на ранних этапах течения острой кишечной инфекции у детей позволяет снизить нарушение трофического статуса на фоне ОКИ, способствует более быстрому купированию симптомов заболевания, ускоряет процесс реконвалесценции и соответственно улучшает исходызаболевания.

Представитель ООО «Альтфарм» Самсонова Т.Н.

Суппозитории «Корилип» апробировались в отделении лечебной физкультуры и спортивной медицины (руководитель отделения -профессор Поляков С.Д.), в клинико-диагностическом центре НЦЗД РАМН.

Состав суппозиториев разработан совместными усилиями сотрудниками лаборатории цитохимии института под руководством профессора Нарциссова Р.П. и сотрудниками НИИ фармации под руководством канд. фарм. наук Г.С.Киселёвой и Л.В. Сологуб. Состав суппозиториев был определён на основании изменений ферментативной активности в клетках периферической крови и внутренних органов.

Суппозиторий «Корилип» содержит:

• кокарбоксилазу,
• рибофлавин (витамин В2),
• липоевую кислоту.

Все продукты питания в организме расщепляются до ацетил-КоА (аминокислоты — до кетоглутарата, сукцината, фумарата и оксалоацетата), который вступает в конечный путь окисления — в цикл трикарбоновых кислот. Оптимизировать деятельность ферментных систем цикла Кребса можно разными путями, в частности, введением субстратов иликофакторов.

Активация цикла ди- и трикарбоновых кислот возможна также путем регуляции двух важных этапов: 1) окисления пировиноградной кислоты до ацетил-КоА и затем взаимодействия с оксалоацетатом до образования лимонной кислоты; 2) окисления кетоглутаровой кислоты до сукцината (янтарной кислоты). Оба эти этапа катализируются полиферментными комплексами в состав которых входит липоевая кислота.

Кокарбоксилаза является коферментом ферментов, участвующих в процессах углеводного обмена, катализирует карбоксилирование и декарбоксилирование а-кетокислот. Рибофлавинмононуклеотид (ФМН) представляет собой готовую форму кофермента, образующуюся в организме из рибофлавина (В2) путем фосфорилирования. ФМН является предшественником одного из основных переносчиков электронов -флавинадениннуклеотида. ФМН входит в состав активного центра флавиндегидрогеназ, в частности сукцината и а-глицерофосфата.

Комплекс «Корилип» показан в случаях понижения активностифлавопротеидов (в более выраженной формеэто проявление хронической тканевой гипоксии), деформации клеточного распределения в сторону преобладания клеток с низкой активностью, низким клеточным разнообразием и пр.

Применение суппозиториев в детской практике в значительной степени определяется необходимостью ограничения внутривенных и внутримышечных инъекций, особенно у новорожденных и грудных детей.

Основная задача данного исследования — оценка эффективности применения суппозиториев «Корилип» у пациентов разного возраста была решена с использованием ряда функциональных, биохимических, цитохимических и математико-статистических методов исследования.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

В отделении лечебной физкультуры и врачебного контроля было обследовано 112 детей в возрасте от 9 до 14 лет, занимающихся спортом (спортивный стаж колебался от 1 года до 6 лет).

Перед назначением комплекса «Корилип» и после курса терапии проводилось комплексное исследование состояния сердечно-сосудистой системы юных спортсменов. Для оценки вегетативной регуляции кровообращения использовали анализатор вариабельности сердечного ритма (Научно-технический центр по медицинской технике «Медасс»). Для оценки вегетативной реактивности проводили активную ортостатическую пробу срегистрацией показателей вариабельности сердечного ритма в течение 5 минут лежа и 5 минут стоя. Регистрация ЭКГ проводилась в положении лежа, по общепринятой методике в 12 стандартных отведениях на шестиканальном электрокардиографе RFT «Bioset-6000 » (Германия). Всем детям проводилась гипервентиляционная проба.

Психологическое анкетирование проводилось по двум тестам -Спилбергера (определение уровня тревожности), САН (самочувствие, активность, настроение).

Коррекция ректальными суппозиториями с кофакторами и субстратами проводилась также у 125 детей раннего возраста посещающих детские дошкольные учреждения, из которых 85 детей были практически здоровыми, 40 детей — частоболеющими.

Назначение и контроль за эффективностью суппозиториев «Корилип» осуществлялся с помощью количественного цитохимического анализа. Ферментный статус лимфоцитов периферической крови исследовали в классическом варианте постановки реакции (Р.П.Нарциссов, 1969-1984), включающем определение активности сукцинатдегидрогеназы(СДГ) и глицерофосфатдегидрогеназы (ГФДГ), а также в различных модификациях классического варианта, позволяющих оценить проницаемость мембран и устойчивость локуса митохондрий, содержащего сукцинатдегидрогеназу. Проницаемость мембранымитохондрий опосредованно оценивали по активности СДГ после 10 мин. инкубации. Исходили из того, что скорость образования продукта реакции при выявлении активности СДГ максимальна в первые минуты экспозиции и минимальна при времени экспозиции 60 минут.

Для оценки функциональной активности митохондрий использовали цитоморфоденситометрический метод определения активности СДГ на анализаторе изображения фирмы «Диаморф». (Р.П.Нарциссов, 1998; С.В.Петричук и соав. 2001). Анализатор изображения клетки помимо подсчета числа гранул формазана — продукта цитохимической реакции — в каждой клетке позволяет определить их геометрические и оптические параметры (рис.1). При определении активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) — фермента, локализованного на внутренней мембране митохондрий и отражающего функциональную активность митохондрий, геометрические размеры гранул (площадь, периметр) представляют собой размеры митохондрий, а оптическая плотность — интенсивность ферментной реакции. Метод позволяет оценить функциональную активность отдельно лежащих митохондрий и митохондрий, объединенных в конгломераты (кластеры).

Рис.1 Цитоморфоденситометрический метод в оценке функциональной активности митохондрий лимфоцитов при определении активности сукцинатдегидрогеназы.

При патологическом процессе в первую очередь изменения затрагивают отдельно лежащие митохондрии, у которых сначала изменяется их площадь, а затем оптическая плотность. Более тяжелые патологические состояния приводят к уменьшению функциональнойактивности как отдельно лежащих гранул, так и кластеров.

Анализ функциональной активности митохондрий на основецитоморфоденситометрических параметров позволяет выявить особенности течения патологического процесса на субклеточном уровне и оценить эффективность любого проводимого лечения.

РЕЗУЛЬТАТЫ

 В отделении лечебной физкультуры и врачебного контроля НЦЗД

РАМН было обследовано 112 детей в возрасте от 9 до 14 лет, занимающихся спортом (спортивный стаж колебался от 1 года до 6 лет). Необходимо отметить, что при занятиях спортом часто не учитывают возрастные анатомо-физиологические особенности организма детей и своеобразия их реакции приспособления к интенсивным мышечным нагрузкам, которые могут повлечь за собой перегрузки, нарушения в гармоничности развития, возникновение той либо иной патологии. Анализ исследований заболеваемости среди спортсменов свидетельствует, что сердечно-сосудистая система является одной из наиболее чувствительных к действию нерациональных режимов тренировок и соревнований,особенно, воздействию чрезмерных физических нагрузок и предельного психоэмоционального напряжения.

 В связи с этим, для улучшения процессов адаптации к мышечным нагрузкам, 65 детям была проведена коррекция энергетического состояния тремя 10-дневными курсами комплекса «Корилип».

 При проведении гипервентиляционной пробы выявлены изменения биоэлектрической активности миокарда в виде нарушения процессов реполяризации НПР), которые мы условно разделили на умеренные (снижение зубца Т не более 50%) и выраженные (зубец Т становился изоэлектричным) в грудных отведениях V 5 — 6 .

 Установлены умеренные нарушения процессов реполяризации у детей в 9 -11 лет в 15 %, а в 12 — 14 лет- 17,6 %. Выраженные нарушения отмечались в возрасте 12-4 лет в 4 раза чаще по сравнению с детьми 9-11 лет (7,8 % и 1,8 % соответственно), что можно расценивать как признаки перетренированности детского организма. Эти данные также свидетельствуют о повышенном риске возникновения сердечно-сосудистых нарушений у детей пубертатного периода.

 В результате проведенного лечения комплексом «Корилип» достигнут положительный эффект — нормализация биоэлектрической активности миокарда в 94% у детей 9-11 лет и 92% — 12-14 лет при умеренных НПР миокарда и в 82 % у детей 9-11 лет и 78% — 12-14 лет — при выраженных НПР (Рис.2).

Рис. 2. Частота выявлений НПР (%) у детей в возрасте 9-14 лет до и после курсового применения комплекса «Корилип».

По данным психологического тестирования в 78% случаев у детей выявлялся средний уровень тревоги, характеризующийся немотивированным беспокойством. Высокий уровень тревожности, установленный в 17% случаев, характеризовался сильным беспокойством, нервозностью и беспокойной активностью, иногда без внешней причины. И только 5 % обследованных детей оказались достаточно уравновешены (таблица 1).

По данным теста САН у 36% юных спортсменов выявлялись: апатия, небольшая усталость и утомление, для 28% наиболее характерными были: легко развивающееся утомление, низкая работоспособность, вялость, внутренний дискомфорт, неудовлетворительное самочувствие. И только в 36% случаев имели место: высокая работоспособность, бодрость, прекрасное самочувствие, полнота сил, готовность к деятельности.

 Таблица 1.

 Динамика данных психологического статуса детей в возрасте 9-14 после курсового лечения комплексом «Корилип»

Психологически! статус	Характеристики	До лечения (в %)	После лечения (в %)
Уровеньтревожности	уравновешен		14
	средний	78	82
	высокий	17	4
Утомление	отсутствие	36	44
	незначительное	36	49
	легко развивающееся	28	7

 У 58 детей в возрасте 9-14 лет проведена оценка эффективности комплекса «Корилип» на уровне митохондрий лимфоцитов цитоморфоденситометрическим методом.

У условно здоровых детей, не подвергавшихся интенсивным мышечным и эмоциональным нагрузкам, наблюдается высокая функциональная активность митохондрий лимфоцитов при выявлении активности СДГ. Количество очагов ферментной активности составляет 15-17на клетку, наиболее активно работающие митохондрии объединяются в кластеры по 8-10 митохондрий с увеличенной оптической плотностью (на 50% по сравнению с отдельно лежащими митохондриями).

У детей, занимающихся спортом, наблюдаются изменения функциональной активности митохондрий лимфоцитов при выявлении СДГ в виде интенсификации конгломератов митохондрий и торможении отдельно лежащих митохондрий (рис. 3). При коррекции препаратом «Корилип» мы наблюдаем изменение функциональной активности митохондрий в сторону нормализации: уменьшается количество возбужденных митохондрий, увеличивается количество типичных митохондрий с умеренной активностью, характерных для функционально уравновешенного состояния.

Таким образом, на фоне используемой комбинации энергооптимизирующих препаратов комплекса «Корилип» у детей, интенсивно занимающихся спортом, происходит нормализация субклеточного и клеточного уровня, нормализация функциональныхизменений сердечно-сосудистой системы, а также повышается физическаяработоспособность; нормализуется биоэлектрическая активность миокарда; отмечается снижение обострений очагов хронической инфекции; уменьшаются астено-невротические проявления, происходит нормализация психоэмоционального статуса.

Рис. 3. Изменение функциональной активности митохондрий лимфоцитов (интегральная оптическая плотности при выявлении активности СДГ) детей, занимающихся спортом, на фоне приема препаратного комплекса «Корилип».

Эффективность применения, отсутствие побочных эффектов, простота использования позволяют рекомендовать препараты комплекса «Корилип» детям в возрасте 9 — 14 лет, интенсивно занимающихся спортом, с целью профилактики функциональных изменений сердечно-сосудистой системы, что наряду с подбором адекватной физической нагрузки позволяет регулировать тренировочный процесс юных спортсменов.

Коррекция энергетического обмена препаратным комплексом «Корилип» проводилась также у 125 детей в возрасте 3-6 лет, посещающих детские дошкольные учреждения. Суппозитории назначались 10-дневными курсами в течение 3 месяцев. Применение этого комплекса значительно облегчило адаптацию детей к детскому учреждению, у частоболеющих детей (п=40) в 2 раза снизило частоту заболевания ОРЗ.

Таким образом, проведенные нами исследования показали эффективность применения препарата «Корилип» у детей раннего и школьного возраста. У здорового ребенка метаболитная терапия должна применяться в «критические периоды» развития: в периоды становления новых функций (ребенок начинает держать головку, начинает сидеть, стоять, ходить и т.д.), перед поступлением в детское учреждение, в периоды инфекционных эпидемий, перед проведением профилактических прививок, во время заболевания, перед интенсивными физическими и умственными нагрузками и в любой другой стрессовой ситуации.

Литература:

1. Дегтярева Е. А. Перспективы использования биологических активных препаратов в спортивной медицине. — М.:2000. — 59 с.
2. Кондрашова М.Н. Метаболические состояния митохондрий при разных физиологических состояниях организма // Молекулярные механизмы и регуляция экспериментального обмена. — Пущино, 1987.- с. 140-153.
3. Кондрашова М.Н., Григоренко Е.В., Бабский А.М. Гомеостазирование физиологических функций на уровне митохондрий // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза.- Новосибирск: Наука, 1987.- с. 40-77
4. И.Т. Корнеева, С.Д.Поляков, СВ. Петричук, В.М. Шищенко, З.Н.
5. Духова Возможности коррекции физической нагрузки препаратами метаболического действия у юных спортсменов.// Международная научно-практическая конференция «Экология и здоровье детей России». Смоленск, 2000. -С. 74-75.
6. Лукьянова Л.Д. Особенности работы дыхательной цепи в условиях кислородной недостаточности // Молекулярные механизмы и регуляция энергетического обмена. — Пущино, 1987.- с. 153-161.
7. Марьяновский А. А. Концепция комплексной терапии заболеваний сердечно-сосудистой системы. // Биологическая медицина.- 1997, №1. -С. 51-56.
8. Нарциссов Р.П. Анализ изображения клетки — следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии. // Педиатрия, 1998.-№4.- С. 101-105.
9. Нарциссов Р.П. и др. Здоровье, болезнь и лекарство (цитохимическая экспертиза с помощью анализатора изображений). — М, 1999. — 25 с.
10. Нарциссов Р.П., Кузнецова М.Н., Петричук СВ., Духова З.Н. «Педагогический прогноз» на основе соматического состояния дошкольника. //В сб.: Социальная технология научно-практической
    школы им. Ю.Ф.Знамовского «Здоровый дошкольник». М., 2001. — С.141-144.
11. 10.Петричук СВ., Шищенко В.М., Духова З.Н. Цитоморфометрическая характеристика лимфоцитов у здоровых и больных детей Т Москва, Россия. Материалы IX съезда педиатров России ; «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.449.
12. Петричук СВ., Шищенко В.М., Духова З.Н. Цитоморфометрический метод в оценке функциональной активности митохондрий лимфоцитов в норме и при патологии. // В сб.: «Митохондрии в патологии». Пущино, 2001.-С. 19-20
13. Поляков СД. , И.Т. Корнеева, СВ. Петричук , В.М. Шищенко , З.Н. Духова . «Влияние метаболитных препаратов на аэробную выносливость у юных спортсменов » НИИ педиатрии НЦЗД РАМН , г. М, 2001. Сборник тезисов международной конференции; « Медицина и физическая культура на рубеже тысячелетий » стр. 117.

В последние годы на фоне резкого снижения рождаемости в Москве отмечается существенное нарастание частоты перинатальной патологии (в 1.5-2 раза), стабилизация частоты и рождения недоношенных детей (7-9%). Наблюдается определенный патоморфоз заболеваний периода новорожденности, патогенетически связанный с ухудшением состояния здоровья матерей. Большинство заболеваний у детей характеризуется полисистемными нарушениями, нейросоматическими расстройствами, протекающими на фоне значительно сниженной резистентности в репаративном периоде таких заболеваний, как перинатальная энцефалопатия, сепсис, пневмония, респираторный дистресс-синдром. У большинства детей отмечаются стойкие нарушения функций различных органов и систем, развивается синдром дизадаптации (синдром повышенной возбудимости, дисбактериоз, дискинезия желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, затяжное и рецидивирующее течение ОРВИ ).

Ни для кого не секрет, что здоровье женщины репродуктивного возраста до беременности определяет состояние здоровья ее будущего ребенка. При этом зачастую оказывается, что отсутствие клинических симптомов заболевания на момент осмотра не является истинным показателем здоровья. При тщательном лабораторном и инструментальном обследовании могут быть выявлены симптомы хронических заболеваний, находящихся в стадии ремиссии, персистирующие вирусные инфекции, нарушения липидного обмена и т.д.. Ведь изменения на клеточном уровне появляются зачастую до формирования клинических симптомов болезни и сохраняются некоторое время после их купирования. Все эти состояния нарушают энергетический метаболизм клеток и приводят к формированию тканевой гипоксии, которая в свою очередь, может являться пусковым механизмом возникновения целого ряда дисфункций различных органов и систем, особенно репродуктивной системы. Контроль за состоянием энергетического обмена у беременной женщины позволяет своевременно выявлять тканевую гипоксию плода и вовремя принимать меры по ее коррекции.

Существует прямая связь между цитохимическими показателями беременной женщины и гистохимическими показателями развивающегося плода. Показатели ферментного статуса лимфоцитов женщины на 7-10 неделе являются прогностически значимыми для оценки состояния энергетического обмена у развивающегося ребенка в течение всей беременности. Не менее важно и динамическое наблюдение за состоянием энергетическолго обмена у детей различного возраста, особенно у новорожденных и детей первого года жизни. Изменения энергетического метаболизма клеток головного мозга, кардиомиоцитов, эпителиальных клетокслизистой оболочки кишечника у новорожденного ребенка, перенесшего хроническую антенатальную или острую интранатальную гипоксию, приводят к формированию дисфункций вышеперечисленных органов, что нарушает процессы адаптации новорожденного ребенка. Своевременно назначенная метаболитная терапия позволяет корригировать нарушения энергетического обмена клеток и предотвратить развитие подобных дисфункций.

В настоящий момент накоплен большой клинический материал по применению различных метаболических комплексов под контролем показателей количественного цитохимического анализа крови при лечении различной патологии. Разработаны схемы метаболитной терапии, назначаемые в зависимости от показателей цитохимического исследования крови и лежащие в основе профилактики развития патологии беременности. Применение этих схем при подготовке к беременности и во время нее позволяет оптимизировать процессы энергообмена и, таким образом, снижает риск перинатальной патологии у будущего ребенка.

Метаболитная коррекция нарушений энергетического обмена у женщин должна быть первой ступенью медицинской помощи. Она представляет собой наиболее физиологическое медикаментозное пособие, позволяющее в большинстве случаев повысить эффективность любого базового лечения, а часто и просто избежать его.

Совокупность выявленных цитохимических изменений определяет направленность метаболитной терапии. В настоящий момент на основании цитохимических исследований энергетического обмена разработан целый ряд комбинированных препаратов метаболического действия. При низких показателях активности митохондриальных флавопротеидов у пациента обосновано назначить кофакторы цикла трикарбоновых кислот. Основу этого комплекса составляют липоевая кислота, кокарбоксилаза, рибофлавин мононуклеотид, пантотенат кальция.

Известно, что парентеральное введение препаратов-метаболитов более эффективно, по сравнению с энтеральным, и это резко ограничивает назначение данных препаратов в амбулаторной практике. Как альтернатива парентеральному пути введения предлагаются метаболические комплексы в виде суппозиториев. Биодоступность препаратов при подобном пути введения значительно повышается и по степени эффективности не уступает той, которая наблюдается при парентеральном пути введения. При разработке подобных комплексов основное внимание уделяется синергизму действия препаратов при коррекции биохимических процессов в клетке. Метаболический комплекс «Корилип», содержащий липоевую кислоту, кокарбоксилазу и рибофлавин мононуклеотид доказано эффективно воздействует на энергообмен в клетке, устраняя энергодефицитные состояния.

Исследования НИИ педиатрии совместно с Центром акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, с Московским противогерпетическим центром и с 25 роддомом с участием 64 женщин группы риска и их детей, наблюдавшихся на протяжении года после рождения, доказали насколько важно применение препаратов энергонормализующего действия у женщин готовящихся к беременности и у беременных.

Суппозитории «Корилип» применялись на фоне базисной терапии у 31 женщины во время беременности под обязательным контролем цитохимического анализа. Только базисную терапию получали 33 женщины группы сравнения. Было установлено, что у беременных женщин группы риска, получавших курсовое лечение комплексом «Корилип» на фоне базисной терапии, частота осложнений беременности повторными ОРВИ в 2,5 раза ниже по сравнению с группой сравнения. У них реже отмечались обострения хронических очагов инфекции. Гипохромная анемия у беременных диагностировалась в 2,9 раз реже у получавших «Корилип».

Наиболее эффективное по отношению к ребенку применение «Корилипа» наблюдалось у женщин, получавших терапию за 6-9 месяцев до и в течение беременности. Раннее применение препарата обеспечивает более высокий уровень энергетики тканей и клеток беременной женщины (плаценты, тканей плода), новорожденных и грудных детей, сведение к минимуму перинатальных осложнений, лучшему развитию детей на первом году жизни.

В течение беременности обосновано назначение метаболического пособия в критические периоды (по цитохимическим показателям):5-8 недель, 10-12 недель, 20 неделя,27-28 недель, 30-32 неделя, 35-37 недель.

Метаболическое пособие в виде комплекса «Корилип» необходимо назначать всем женщинам, особенно тем, кто относится к группам высокого риска развития перинатальной патологии у детей.

В группу риска входят женщины:

• с отягощенным акушерским анамнезом в виде повторных выкидышей, мертворождений, бесплодия;
• с хроническими воспалительными заболеваниями придатков;
• женщины с хроническими соматическими заболеваниями
• часто болеющие ОРВИ
• имеющие высокую эмоциональную и физическую нагрузку.

Женщинам группы риска показано назначение комплекса «Корилип» как в качестве самостоятельного лечения, так и в комплексе со специализированной терапией. Как правило, необходимо не менее 6-8 курсов по 10 дней комплексом «Корилип» для нормализации показателей ферментного статуса и самочувствия женщины.

«Корилип» для женщин, готовящихся к беременности, и у беременных выступает как необходимая, эффективная и безопасная метаболическая помощь. Сводит к минимуму перинатальные осложнения и способствует лучшему развитию детей на первом году жизни.

Здоровье женщины до беременности определяет состояние здоровья ее будущего ребенка. Научно доказано, что учащение заболеваний в период новорожденности напрямую связанно с ухудшением состояния здоровья матерей. Как же можно предупредить развитие серьезных патологических состояний у ребенка и улучшить здоровье его матери?

Доказано, что нарушение энергетического обмена у беременной женщины приводит к нарушению обеспечения кислородом тканей плода. Значит, для полноценного развития плода необходимо положительно воздействовать лекарственными препаратами на энергетический обмен матери. Выполнить эту роль может современное метаболическое средства с доказанной эффективностью и безопасностью-Корилип — оригинальный препарат компании «Альтфарм». Основу этого комплекса составляют липоевая кислота, кокарбоксилаза и рибофлавин мононуклеотид. Метаболический комплекс «Корилип», доказано эффективно воздействует на энергообмен в клетке. Каждый из компонентов Корилипа нормализует углеводный, белковый и жировой обмен, активизирует энергетику клетки, улучшает работу печени, защищает организм от воздействия токсинов. Корилип не только улучшает доставку кислорода к тканям, он также способствует улучшению иммунитета. Применяя Корилип беременная женщина защищает себя и будущего ребенка от кислородного голодания, нарушения питания клеток и тканей организма, слабой устойчивости к инфекциям.

Метаболический комплекс «Корилип» неслучайно выпускается в виде суппозиториев. Биологическая доступность препаратов при подобном пути введения значительно повышается и по степени эффективности не уступает той, которая наблюдается при внутримышечном пути введения. А это значит, что можно избежать болезненных уколов и нежелательных последствий от инъекций. У беременных женщин, получающих курсовое лечение комплексом «Корилип», доказано снижается частота осложнений беременности повторными ОРВИ, у них гораздо реже возникает железодефицитная анемия и обострение хронических инфекций.

Наиболее эффективное по отношению к ребенку применение «Корилипа» наблюдается у женщин, получающих терапию за 6-9 месяцев до и в течение беременности. Раннее применение Корилипа обеспечивает более высокий уровень энергетики тканей и клеток беременной женщины (плаценты, тканей плода), новорожденных и грудных детей, сводит к минимуму возникновение осложнений, способствует лучшему развитию детей на первом году жизни. В течение беременности Корилип лучше применять в критические периоды:5-8 недель, 10-12 недель, 20 неделя,27-28 недель, 30-32 неделя, 35-37 недель.

Таким образом, Корилип для женщин, готовящихся к беременности, и у беременных выступает как необходимая, эффективная и безопасная метаболическая помощь. Сводит к минимуму осложнения в развитии плода и способствует лучшему развитию детей на первом году жизни.

Авторы: Романова Е.Ю., Ленева О.И., Волова Л.Т., Лимарева Л.В., Милякова М.Н.

Кафедра акушерства и гинекологии Института последипломного образования. ЦНИЛ Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия

Роль оксидантного стресса в дисфункции эндотелия с развитием поздних гестозов и патологии плаценты убедительно доказана в работах отечественных и иностранных авторов (Сидельникова В. М., Крукиер И. И., Burton G). Метаболические нарушения при гестозе, сопровождающиеся деструкцией мембран и активацией свободнорадикального окисления липидов, создают условия для нарушения внутриутробного развития плода, существенно ухудшая исход беременности. Особое значение имеет роль гипергомоцистеинемии в патогенезе микроциркуляторных осложнений в акушерской практике. Актуальным является изучение течения беременности в условиях оксидантного стресса на фоне гипергомоцистеинемии и возможности улучшения исходов в акушерстве путем медикаментозной коррекции системы эндогенных антиоксидантов при беременности, осложненной поздним гестозом.

Целью работы явилась оценка эффективности комплексной терапии с применением антиоксидантов в плане улучшения исходов беременности у пациенток с гестозами на фоне гипергомоцистеинемии.

Были обследованы 85 беременных в сроке 28–39 недель гестации с гестозами средней степени тяжести с выделением 35 беременных, получавших комплекс метаболических антиоксидантных средств, включая S-аденозил-L-метионин, «корилип» (кокарбоксилаза, рибофлавин, липоевая кислота) и поливитаминный комплекс, содержащий L-метилфолат и ДГК (Фемибион 400) (основная группа). Группы были сопоставимы по возрасту, акушерско-гинекологическому анамнезу, гестационному сроку. Помимо общепринятых лабораторных и функциональных методов исследования выполнено изучение генетического полиморфизма гена фолатного обменаMTHFR Ala222Val (C-677-T) с помощью ПЦР-диагностики, иммунохимическое определение сывороточного гомоцистеина (ГЦ). Активность каталазы, СОД, глутатионредуктазы, глутатион, МДА, диеновые конъюгаты оценивались спектрофотометрией до и после проведения комплексного лечения. Проведенные исследования продемонстрировали дисбаланс между системами свободнорадикального окисления (СРО) и антиоксидантной защиты при беременности, осложненной гестозом средней степени тяжести в виде более низкого по сравнению с физиологической беременностью показателя глутатиона эритроцитов (0,096 мкм/мг), низкой активности глутатион-редуктазы и каталазы (соответственно 70,77 мкм/мг Hb в час и 115,41 ммоль/мг Hb), активации СОД (309,05 у. е./мг белка). Возрастало содержание недоокисленных липидных перекисей (МДА) до 0,043 опт/ед, диеновые конъюгаты зарегистрированы на уровне 0,57 опт/ед. У 14 (16,28%) обследованных беременных выявлена умеренная гипергомоцистеинемия (ГГЦ) на уровне от 12 до 21 мкмоль/л (14,62+2,3 мкмоль/л); 42,9% беременных с ГГЦ имели гомозиготную мутацию, 57,1% -гетерозиготную мутацию гена MTHFR Ala222Val (C-677-T). Среди беременных без ГГЦ выявлено 6,98% бессимптомных носительниц гомозиготного и 23,26% носительниц гетерозиготного полиморфизма в гене MTHFR.

ГГЦ способствовала формированию более выраженных форм гестоза, угрозы невынашивания (85,7%), развитию фетоплацентарной недостаточности (28,57%), подтвержденной ультразвуковыми критериями и наличием облитерационной ангиопатии сосудов стволовых ворсин в плацентах (28,6%). Отмечалось снижение частоты преждевременных родов (36,67% в основной; 46,15% в группе сравнения), объема кровопотери (413,33 мл в основной; 483 мл в группе сравнения), тенденция к нормосомии плода (3019,4 кг в основной; 2637,2 кг в группе сравнения) среди беременных, получавших комплексную антиоксидантную терапию. Лабораторные показатели в основной группе продемонстрировали положительную динамику на примере тромбоцитарного звена (219,07*109 до, 252,7 *109 после лечения), показателей сывороточного белка с 61,25 г/л до 63,24 г/л; ЩФ с 195,77 Ед до167,27 Ед; АЛТ с 31,21 ед/л до 24,27 ед/л; билирубина с 10,31 мкмоль/л до 9,12 мкмоль/л, холестерина с 6,83 ммоль/л до 5,91 ммоль/л соответственно до и после лечения. Показатели гемостазиограммы в основной группе имели тенденцию к нормокоагуляции после проведения комплексной антиоксидантной терапии (активированное время рекальцификации 57+2״, ПТИ 103+5,2%, тромботест IV, фибриноген 4,2+1,3 г/л, толерантность к гепарину 10+2’, эуглобулиновый фибринолиз 150–200’).

Данные, полученные нами у 35 беременных с гестозами при применении антиоксидантов, свидетельствуют об их высокой эффективности и приемлимости у данной категории пациенток, способствующей нормализации основных биохимических показателей, коагулограммы, повышенного уровня ГЦ, активации показателей антиоксидантной защиты (каталазы, глутатион-редуктазы) в 1,3–1,8 раз и снижению частоты невынашивания беременности, объема патологической кровопотери, ВЗРП, неонатальной заболеваемости в 1,5–2,5 раза.

Авторы: Руководитель лаборатории цитохимии, Доктор биологических наук Петричук С.В.; Главный научный сотрудник Доктор медицинских наук, профессор Шищенко В.М.

Цивилизованность человека предполагает бережное отношение к своим предкам и своему потомству, поскольку лишь в рамках культурной преемственности возможно поддержание и тем более развитие сложных технологий. Это подтверждается всей историей человечества. Сейчас совместными усилиями всего населения в рамках существующего экономического уклада готовится состояние здоровья человека на ближайшие годы, обозримых в прогнозах де­сятилетий, что может составить основу стратегического подхода к обеспечению страхования материнства и детства.

В последние годы на фоне резкого снижения рождаемости в Москве отмечается существенное нарастание частоты перинаталь­ной патологии (в 1,5-2 раза), стабилизация частоты и рождения не­доношенных детей (7-9%). Наблюдается определенный патоморфоззаболеваний периода новорожденности, патогенетически связанный с ухудшением состояния здоровья матерей: большинство заболева­ний у детей характеризуется полисистемными нарушениями, нейро-соматическими расстройствами, протекающими на фоне значитель­но сниженной резистентности в репаративном периоде таких заболеваний, как перинатальная энцефалопатия, сепсис, пневмония, респираторный дистресс-синдром и т.д.. У большинства детей отмечаются стойкие нарушения функций различных органов исистем, развивается синдром дизадаптации (синдром повышенной возбудимости, дизбактериоз, дискенезия желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, затяжное и рецидивирующее течеиие ОРВИ.

У 70-95% новорожденных с клинически выраженной патоло­гией доказано наличие врождённой энтеровирусной инфекции, что связано с вертикальной передачей вирусов, т.е. с заражением плода от матери с хронической формой соответствующей инфекции. Срывадаптации материнского организма к эндогенной вирусной инфекции при вертикальной передаче вируса является основным условием осложнённого течения беременности и относительно тяжёлого тече­ния внутриутробной инфекции.

При моделировании хронической Коксаки вирусной инфек­ции и вертикальной передачи вируса на мышах была подтверждена этиологическая связь депрессии ферментов аэробного дыхания в лимфоцитах периферической крови с вирусной инфекцией. Приме­нение соответствующего комплекса препаратов (кофакторов и субстратов цикла Кребса) у самок с хронической инфекцией сопровож­далось повышением активности дегидрогеназ сукцината, альфа-глицерофосфата, глутамата в лимфоцитах периферической крови и тканях внутренних органов; одновременным достоверным снижени­ем активности накопления вируса в организме самок и их плодов. В связи с тем, что одним из ведущих звеньев патогенеза хронической Коксаки вирусной инфекции является индуцированная вирусом гистологическая гипоксия, нами было проведено изучение противовирусной активности в эксперименте и клиническое испытание препаратов метаболического действия с разными вариантами введения (внутримышечно, в виде таблеток и порошков, в виде ректальныхсуппозиториев).

Всё вышесказанное определило одно из направлений работы лаборатории цитохимии совместно с рядом клинических отделений НИИ педиатрии НЦЗД РАМН и других медицинских учреждений г.Москвы: коррекция ферментного статуса клеток крови, отражаю­щего функциональное состояние внутренних органов и организма в целом, кофакторами и субстратами у пациентов разного возраста.

В течение последних 18 лет в НИИ педиатрии РАМН прово­дятся исследования по применению кофакторов и субстратов раз­личных метаболических циклов в лечении детей; проведены клини­ческие испытания двух метаболических комплексов, которые былипредставлены в виде ректальных суппозиториев «Корилип».

Суппозиторий «Корилип» содержит:

• кокарбоксилазу,
• рибофлавин (витамин В2),
• липоевую кислоту.

Все продукты питания в организме расщепляются до ацетил-КоА (аминокислоты — до кетоглутарата, сукцината, фумарата и окса-лоацетата), который вступает в конечный путь окисления — в цикл трикарбоновых кислот. Оптимизировать деятельность ферментных систем цикла Кребса можно разными путями, в частности, введени­ем субстратов или кофакторов.

Активация цикла ди- и трикарбоновых кислот возможна также путем регуляции двух важных этапов: 1) окисления пировиноградной кислоты до ацетил-КоА и затем взаимодействия с оксалоацетатом до образования лимонной кислоты; 2) окисления кетоглутаровой кислоты до сукцината (янтарной кислоты). Оба эти этапа катализируются полиферментными комплексами в состав которых входит липоевая кислота.

Кокарбоксилазаявляется коферментом ферментов, участвующих в процессах углеводного обмена, катализирует карбоксилирование и декарбоксилирование ос-кетокислот. Рибофлавинмоно-нуклеотид (ФМН) представляет собой готовую форму кофермента, образующуюся в организме из рибофлавина(В2) путем фосфорилирования. ФМН является предшественником одного из основных переносчиков электронов — флавинадениннуклеотида. ФМН входит в состав активного центра флавиндегидрогеназ, в частности сукцината и а-глицерофосфата.

Комплекс «Корилип» показан в случаях понижения активно­сти флавопротеидов (в более выраженной форме — это проявление хронической тканевой гипоксии), деформации клеточного распределения в сторону преобладания клеток с низкой активностью, низким клеточным разнообразием и пр.

Суппозитории «Корилип» апробировались в клинико-диагностическом центре и лаборатории цитохимии НИИ педиатрии НЦЗД РАМН. Исследования проводились совместно с Центром акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, с Московскимпротивогерпетическим центром, с 25-м роддомом.

Состав суппозиториев разработан совместными усилиями со­трудниками лаборатории цитохимии института под руководством профессора Нарциссова Р.П. и сотрудниками НИИ фармации под руководством канд. фарм. наук Г.С.Киселёвой и Л.В. Сологуб. Со­став суппозиториев был определён на основании изменений ферментативной активности в клетках периферической крови и внутренних органов.

Основная задача данного исследования — оценка эффективности применения суппозиториев «Корилип» у пациентов разного воз­раста была решена с использованием ряда функциональных, биохи­мических, цитохимических и математико-статистических методовисследования.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Испытание превентивной эффективности суппозиториев про­водилось у 64 женщин группы риска и у их детей, наблюдавшихся на протяжении года после рождения. Суппозитории применялись на фоне базисной терапии и у 31 женщины во время беременности подобязательным контролем цитохимического анализа (Цитохимическая экспертиза). Только базисную (общепринятую) терапию полу­чали 33 женщины группы сравнения.

Назначение и контроль за эффективностью суппозиториев «Корилип» осуществлялся с помощью количественного цитохими­ческого анализа. Ферментный статус лимфоцитов периферической крови исследовали в классическом варианте постановки реакции (Р.П.Нарциссов, 1969-1984), включающем определение активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и глицерофосфатдегидрогеназы (ГФДГ), а также в различных модификациях классического вариан­та, позволяющих оценить проницаемость мембран и устойчивость локуса митохондрий, содержащего сукцинатдегидрогеназу. Прони­цаемость мембраны митохондрий опосредованно оценивали по ак­тивности СДГ после 10 мин. инкубации. Исходили из того, что скорость образования продукта реакции при выявлении активности СДГ максимальна в первые минуты экспозиции и минимальна при времени экспозиции 60 минут.

Этот метод позволил определять не только среднюю активность фермента, как это делается в биохимических исследованиях, но позволил рассматривать в качестве характеристик параметры распределения клеток по активности фермента — коэффициенты второго, третьего и четвертого порядка (коэффициенты вариации, асимметрии, эксцесса), а также меру клеточного разнообразия (относительную энтропию информации). Совокупность этих параметров распределения по активности фермента и составляет понятие ферментного статуса клеток крови. Не всегда реакцию клеток крови на внешние воздействия удается выявить по изменению средней активности фермента, гораздо чаще изменения затрагивают какую-то часть популяции клеток, что отражается в статистических парамет­рах распределения. Наиболее часто клеткой, с которой работает клинический цитохимик, является лимфоцит.

Анализ клеточной популяции позволяет выявить изменения различных клеточных субпопуляций на фоне еще не измененной средней активности. Эти изменения клеточной структуры появляются рань­ше клинических признаков заболевания (рис.1).

В разгар острого заболевания наблюдается, как правило, небольшая активация всей клеточной популяции лейкоцитов, которая при затяжном течении переходит в депрессию.

В периоде выздоровления или ремиссии при нормализации клинических показателей мы часто наблюдаем отклонения в фер­ментном статусе, что свидетельствует о неполном выздоровлении на уровне клеточной популяции.

Рис. 1. Стадии реакции клеточной популяции лимфоцитов в процессе развития заболевания.

Для оценки функциональной активности митохондрий исполь­зовали цитоморфоденситометрический метод определения активности СДГ на анализаторе изображения фирмы «Диаморф». (Р.П.Нарциссов, 1998; С.В.Петричук и соав. 2001). Анализатор изо­бражения клетки помимо подсчета числа гранул формазана — продукта цитохимической реакции — в каждой клетке позволяет определить их геометрические и оптические параметры (рис.1). При определении активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) — фермента, локализованного на внутренней мембране митохондрий и отражающего функциональную активность митохондрий, геометрические размеры гранул (площадь, периметр) представляют собой размеры ми­тохондрий, а оптическая плотность — интенсивность ферментной реакции. Метод позволяет оценить функциональную активность отдельно лежащих митохондрий и митохондрий, объединенных в конгломераты (кластеры).

При патологическом процессе в первую очередь изменения за­трагивают отдельно лежащие митохондрии, у которых сначала из­меняется их площадь, а затем оптическая плотность. Более тяжелые патологические состояния приводят к уменьшению функциональнойактивности как отдельно лежащих гранул, так и кластеров.

Анализ функциональной активности митохондрий на основецитоморфоденситометрических параметров позволяет выявить особенности течения патологического процесса на субклеточном уров­не и оценить эффективность любого проводимого лечения.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Важное значение применение препаратов энергонормализирующего действия имеет у женщин, готовящихся к беременности и у беременных. Этот подход следует рассматривать как метаболическое пособие, по ассоциации с акушерским пособием.

Различные эксперименты на животных доказали положительный эффект от применения препаратов, входящих в энергонормализирующий комплекс «Корилип». Так, например, введение их на фо­не физиологического течения беременности выявило не только отсутствие эмбриотоксического и тератогенного эффекта, но и их положительное действие: ни одного погибшего помета в опытной группе (против 20% в контрольной) на фоне в два раза большего количества плодов. Результаты других экспериментов свидетельствовали о защитном эффекте метаболической коррекции к действию микробного фактора, способствующим устойчивости потомства мышей при введении беременным самкам стафилококковой культуры.

Метаболическое пособие в виде комплекса «Корилип» необходимо назначать всем женщинам, особенно женщинам группы высокого риска развития перинатальной патологии у детей.

В группу риска входят женщины с отягощенным акушерским анамнезом в виде повторных выкидышей, мертворождений, беспло­дия и хронических воспалительных заболеваний придатков; женщи­ны с хроническими соматическими заболеваниями, часто болеющиеОРВИ, имеющие высокую эмоциональную и физическую нагрузку. Перечисленная патология в значительной степени определяет и ис­ходные (до приема препаратов) цитохимические показатели. У этих женщин, как правило, наблюдается снижение активности СДГ и а-ГФДГ на фоне деформации структуры популяции в виде сниженно­го количества лимфоцитов с типичной активностью (эксцесс меньше -0,8), преобладанием в популяции клеток с низкой активностью (асимметрия меньше — 0,8). Женщинам группы риска показано назначение комплекса «Корилип» как в качестве самостоятельного лечения, так и в комплексе со специализированной терапией.

Выбор продолжительности курсов (10 дней) объясняется тем, что через 4-5 дней после начала приема препаратов наблюдается по­ложительная динамика в цитохимическом статусе лейкоцитов, за­ключающаяся, в частности, в увеличении средней активности СДГ исс-ГФДГ и тенденции к нормализации остальных элементов струк­туры популяции. Количество назначаемых курсов определяется по­ложительной динамикой цитохимических показателей и стабильно­стью их изменений. Как правило, необходимо не менее 6-8 курсовкомплексом «Корилип» для нормализации показателей ферментного статуса и самочувствия женщины (рис. 2)

Рис. 2. Положительная динамика активности сукцинатдегидроге-назы лимфоцитов у женщин группы риска после 6 курсов терапии ком­плексом «Корилип»

Для исследования степени напряжения энергетического мета­болизма в ответ на введение комплекса суппозиториев «Корилип» нами использовалась модификация цитохимического анализа — про­ба с добавлением к основному субстрату модулятора активности СДГ — изолимонной кислоты (проба с изоцитратом, СДГ(ИЗО)) [М.Н.Кондрашова и соав., 1987, Петричук СВ. и соав., 1990]. Из­вестно, что в ответ на действие интенсивного внешнего раздражите­ля происходит резкое повышение выработки энергетических ресур­сов в клетках организма, идущих на обеспечение ответной реакции. Для предотвращения чрезмерного расходования субстратов энерге­тического цикла и истощения митохондриальной активности суще­ствует защитный механизм блокирования основного митохондриального фермента — сукцинатдегидрогеназы. Данный блок инакти-вируется при проведении реакции по выявлению активности СДГ с добавлением изолимонной кислоты к основному субстрату.
Повышение активности фермента в пробе с изолимонной ки­слотой, по сравнению с пробой на основном субстрате свидетельст­вует о напряжении энергетического метаболизма.
Для оценки степени напряжения энергетического метаболизма вычисляется коэффициент К:
К=СДГ(ИЗО)/СДГ=1,15 или 115%

Значение коэффициента «К»>1 является неблагоприятным цитохимическим признаком, свидетельствует о напряжении клеточно­го метаболизма и о нестабильности митохондриальной мембраны. У условно здоровых пациентов значение коэффициента «К» составляет 80 — 90 %.

В процессе лечения суппозиториями «Корилип» значение ко­эффициента «К» уменьшается и приближается к нормальным значе­ниям.

Таблица 1.

Изменения цитохимических параметров у женщин группы риска, получавших «Корилип» (п=26)

* Изменения достоверны, РО.05

Эффективность метаболической коррекции можно оценить с двух сторон. Во-первых, сравнением течения и исхода беременности в двух группах женщин — получавших и не получавших метаболическое посо­бие. Во-вторых, оценкой исхода беременности и развитием детей на первом году жизни в зависимости от сроков, в которые была начата ме­таболическая коррекция женщинам группы риска.

Выявлено, что у беременных женщин группы риска (п=31), полу­чавших курсовое лечение комплексом «Корилип» на фоне базисной те­рапии, частота осложнений беременности повторными ОРВИ во 2 и 3 триместрах была в 2,5 раза ниже по сравнению с неполучавшими (п=33). У них реже отмечались обострения хронических очагов инфек­ции. Гипохромная анемия у беременных, получавших метаболическую коррекцию, диагностирована в 2,9 раза реже, чем в группе сравнения.

Клинические признаки морфо-функциональной незрелости среди доношенных детей (выраженное лануго, гипорефлексия, слабый крик, пастозность и отечность подкожно-жировой клетчатки, податливость костей черепа, увеличенные размеры большого родничка) наблюдались у 23,1% детей, получавших комплекс «Корилип», и 42,5% детей — не по­лучавших ее. В свою очередь, среди женшин, которым проведено не ме­нее 6-8 курсов, клинические признаки морфофункциональной незрело­сти отмечались почти в 2 раза реже по сравнению с получившими ее 1 -3 раза.

У женщин, получавших метаболическое пособие за 3-9 месяцев до беременности, наблюдалась стабилизация месячного цикла с наличием четко выраженной двухфазности, меньшей болезненности менструации. Все женщины родили живых доношенных детей (на 39-40-ой неделе) с весом 2800,0-3900,0, оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов, неонатальныйпериод у них протекал без осложнений. На первом году дети практически не болели. К 1 году нервно-психическое развитие у них было нор­мальным и соответствовало 28-30 баллам по таблице Л.Т.Журба.

Основные рекомендации по применению препаратного ком­плекса «Корилип» у женщин состоят в следующем:

• наиболее эффективное по отношению к ребенку применениепрепаратов-метаболитов наблюдается у женщин, получающих терапию за 6-9 месяцев до и в течение беременности под контролем цитохимического анализа. Раннее применение препарата обеспечивает более высокий уровень энергетики тканей и клеток беременной женщины (плаценты, тканей плода), новорожденных и грудных детей, сведение к минимуму перинатальных осложнений, лучшему развитию детей на первом году
  жизни.

• продолжительность курсов терапии комплексом «Корилип» (10дней) и их кратность определяется показателями активности ферментов лейкоцитов периферической крови.

• в течение беременности необходимо назначение метаболического пособия в критические периоды (по цитохимическием показателям): 5-8 недель, 10-12 недель, 20 неделя, 27-28 недель, 30-32 неделя, 35-37 недель.

Подготовка супружеской пары к беременности должна начинать­ся не менее чем за 6-9 месяцев до беременности, в оптимальном варианте год жизни родителей до зачатья должен быть отнесен к онтогенезу ребенка.

Литература :

1. Кондрашова М.Н. Метаболические состояния митохондрий при разных физиологических состояниях организма // Молекулярные механизмы и регуляция экспериментального обмена. — Пущино, 1987.-с. 140-153.
2. Кондрашова М.Н., Григоренко Е.В., Бабский А.М. Гомеостазирование физиологических функций на уровне митохондрий // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза.- Новосибирск: Наука, 1987,- с. 40-66.
3. Коноплева Т.Н., Лозовская Л.С, Сидельникова В.М., ШищенкоВ.М., Морозова Н.А., Бомбардирова Е.П., Зубкова И.В., Королькова Е.Л., Петричук СВ., Духова З.Н. Профилактика внутриутробных вирусных инфекций и связанной с ними патологииплода и ребенка » НЦЗД РАМН, НЦ АГиП РАМН, Москва, Россия. Материалы IX съезда педиатров России: «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.290.
4. Лукьянова Л.Д. Особенности работы дыхательной цепи в условиях кислородной недостаточности // Молекулярные механизмы и регуляция энергетического обмена. — Пущино, 1987.- с. 153-161
5. Мухамедова Х.Т. Эффективность метаболической терапии приинфекционно- воспалительных заболеваниях недоношенных детей: Автореф. дисс….канд. мед. наук. — М., 1988.-23с.
6. Нарциссов Р.П. Анализ изображения клетки — следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии. // Педиатрия, 1998.-№4.-С. 101-105.
7. Нарциссов Р.П. и др. Здоровье, болезнь и лекарство (цитохимическая экспертиза с помощью анализатора изображений). — М.,1999.-25 с.
8. Петричук СВ., Шищенко В.М., Духова З.Н. Цитоморфометри-ческая характеристика лимфоцитов у здоровых и больных детей Т Москва,, Россия, Материалы IX съезда педиатров России; «Детское здравоохранение России: Стратегия развития» М., 2001, стр.449.
9. Петричук СВ., Шищенко В.М., Духова З.Н. Цитоморфометриче-ский метод в оценке функциональной активности митохондрий лимфоцитов в норме и при патологии. // В сб.: «Митохондрии в патологии». Пущино, 2001. — С. 19-20
10. Ю.Усманов У.Х., Киселева Г.С, Цейтина А.Я., Шищенко В.М., Ва-люлис А. Создание и исследование детских суппозиториев с витаминами группы В // Фармацея.- М., 1991.- № 1.-е.20-24.

В последние годы отмечается тенденция к увеличению числа часто болеющих детей (ЧБД), что является одной из актуальных проблем современной педиатрии. Под термином «часто болеющие дети» принято подразумевать детей, у которых частота острых заболеваний составляет 4 и более раз в год. По данным диспансерных осмотров детского населения, К ЧБД можно отнести каждого четвертого ребенка в России. До 85% случаев ОРЗ регистрируется именно у ЧБД.

Каков механизм возникновения патологических состояний у ребенка?

Установлено, что на данный момент у большинства новорожденных детей отмечаются стойкие нарушения функций различных органов и систем, развивается синдром дизадаптации (синдром повышенной возбудимости, дисбактериоз, дискинезия желудочно-кишечного тракта, аллергические реакции, затяжное и рецидивирующее течение ОРВИ). Непосредственно сам период детства характеризуется бурным ростом и развитием, формированием различных органов и систем, усиленным обменом веществ, что требует коррекции обменных нарушений и обеспечения возрастных потребностей ребенка в метаболических средствах. Нарушение процессов энергообмена в клетках и внутренних органах является одной из основных причин практически всех патологических состояний у детей.

Что является основной причиной возникновения частых заболеваний у ребенка?

Установлено, что основная причина возникновения острых заболеваний у ребенка- ослабленный иммунитет. Известно, что при частоте ОРЗ более 6 раз на протяжении года не происходит полного восстановления иммунитета ребенка. Кроме того, часто болеющий ребенок нередко отстает от сверстников в физическом и общем развитии, что ведет к снижению его социальной адаптации в обществе. Вот почему так важно на сегодняшний день проводить своевременную, эффективную и безопасную коррекцию иммунного дисбаланса у детей.

Чем же можно помочь ребенку с нарушенным энергообменом и сниженным иммунитетом?

В комплексную терапию таких детей целесообразно включать препараты с метаболическим действием, способные устранять кислородное голодание тканей и улучшать состояние иммунитета.

Есть ли на сегодняшний день безопасные метаболические препараты для детей разного возраста?

Востребованность адекватной и безопасной метаболитной терапии для детей разного возрастая явилась причиной создания суппозиториев «Корилип»- оригинального метаболического средства компании «Альтфарм». Причем немаловажную роль играла безболезненность введения препарата, так как курс метаболитной терапии достаточно длителен. Ведь применение суппозиториев в детской практике в значительной степени определяется необходимостью ограничения внутривенных и внутримышечных инъекций, особенно у новорожденных и грудных детей.

Чем обусловлен выбор компонентов в составе суппозиториев «Корилип»? Метаболический комплекс « Корилип» включает в себя кокарбоксилазу, рибофлавин и липоевую кислоту. Липоевая кислота участвует в активации цикла Кребса. Кокарбоксилаза активирует тканевой обмен, устраняет нарушения обмена веществ. Рибофлавин участвует в процессах углеводного, белкового и жирового обменов. Использование именно этих важнейших компонентов, участвующих в окислительно-восстановительных реакциях, позволяет организму получить наибольшее количество энергии.

Как быстро «Корилип» может воздействовать на энергообмен при метаболических нарушениях у ребенка?

Действие метаболитов происходит достаточно быстро, и ведет к нвилучшему восприятию медикаментозного и физиотерапевтического лечения. Причем метаболитная терапия может применяться как самостоятельное лечение или в сочетании с основной терапией, что увеличивает ее эффективность.

Каковы основные результаты исследований по применению метаболического комплекса «Корилип» у детей различных возрастов?

Применение препарата «Корилип» способствовало улучшению работы сердечно-сосудистой системы новорожденных. На фоне комплексного лечения уменьшались проявления синдрома внутричерепного повышения давления у детей. Дети становились более активными, восстанавливался их режим сна и бодрствования, отмечалась прибавка в весе. Применение препарата Корилип способствовало уменьшению продолжительности желтухи, сокращению сроков заживления пупочной ранки.

Использование метаболического комплекса «Корилип» у детей с острыми кишечными инфекциям также привело к выраженным положительным результатам. У детей отмечалось более быстрое восстановление аппетита, улучшался психоэмоциональный статус, повышалась физическая активность. Применение суппозиториев «Корилип» практически всегда способствовало сокращению длительности пребывания пациентов в стационаре.

Можно ли применять «Корилип» детям, интенсивно занимающимся спортом?

Сердечно-сосудистая система является одной из наиболее чувствительных к действию нерациональных режимов тренировок и соревнований, особенно воздействию чрезмерных физических нагрузок и предельного психоэмоционального напряжения. В связи с этим, для улучшения процессов адаптации к мышечным нагрузкам, детям, интенсивно занимающимся спортом, показана коррекция энергетического состояния тремя 10-дневными курсами комплекса «Корилип».

Было доказано, что на фоне применения «Корилипа» повышается физическая работоспособность детей и повышается их устойчивость к стрессам. Корилип целесообразно применять для профилактики функциональных изменений сердечно-сосудистой системы, что наряду с подбором адекватной физической нагрузки позволяет регулировать тренировочный процесс юных спортсменов.

Насколько реально снизить частоту острых заболеваний у ЧБД применяя «Корилип»?

Коррекция энергообмена и иммунитета суппозиториями «Корилип» проводилась у детей раннего возраста, посещающих детские дошкольные учреждения. Суппозитории назначались 10-дневными курсами в течение 3 месяцев. Применение этого комплекса значительно облегчило адаптацию детей к детскому учреждению, у часто болеющих детей в 2 раза снизило частоту заболеваний ОРЗ, что также подтвердило эффективность применения препарата «Корилип» у детей раннего и школьного возраста.

В какие периоды развития ребенка наиболее оптимально проводить метаболическую коррекцию Корилипом?

У детей раннего и школьного возраста Корилип должен применяться в «критические периоды» развития: в периоды становления новых функций, перед поступлением в детское учреждение, в периоды инфекционных эпидемий, перед проведением профилактических прививок, во время заболевания и в любой другой стрессовой ситуации.

Каковы основные показания для назначения Корилипа детям?

• чрезмерные эмоциональные и физические перегрузки
• синдром дизадаптации (синдром повышенной возбудимости, дисбактериоз, дискинезия ЖКТ, аллергические реакции, затяжное и рецидивирующее течение ОРВИ)
• снижение иммунитета
• нарушения питания (гипотрофии)
• хронические интоксикации
• бактериальные и вирусные инфекции

Эффективность применения, отсутствие побочных эффектов, простота использования и безболезненный способ введения позволяют длительно назначать Корилип детям всех возрастов и даже новорожденным!